主题:【已应助】实验结束后色谱柱清洗疑问

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guoguoguog
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实验结束后色谱柱清洗

如果使用的流动相不涉及缓冲盐、有机酸或无机酸等添加物,可以直接用纯有机相冲洗,并将色谱柱内充满有机相并封存。

如果使用的流动相含有缓冲盐、有机酸或无机酸等添加物,需要用高比例的水相(如甲醇:水=90:10)冲洗色谱柱30min以上,然后用纯有机相冲洗色谱柱,并将色谱柱内充满有机相并封存。

以上摘自《液相色谱实战宝典》

有几个疑问需要咨询一下,恳请各位大神给予解答:

我使用的色谱柱: C18 150mmX4.6mm

液相色谱型号:北京温分LC98I

1、上面提到的“冲洗”是需要将色谱柱出口端卸下,断开检测器吗?

2、高比例水相冲洗过后,纯有机相冲洗色谱柱,这个纯有机相冲洗有没有时间要求?
推荐答案:歌名回复于2023/01/04
、上面提到的“冲洗”是需要将色谱柱出口端卸下,断开检测器吗?--------------------------------不用断开,只需要更换流动相连着一起冲洗即可
2、高比例水相冲洗过后,纯有机相冲洗色谱柱,这个纯有机相冲洗有没有时间要求?------------------------------------------没有时间上的硬性要求,要求有两点,一是尽可能的使色谱柱充满有机相,二是尽可能的将色谱柱内残留物冲洗出来。
顺带提一下高水相、高有机相冲洗时间都是不定的要根据具体的实际情况来做,例如色谱柱柱长、粒径、进样样品类型、化合物等,宝典里的30min只是个参考值
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歌名
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、上面提到的“冲洗”是需要将色谱柱出口端卸下,断开检测器吗?--------------------------------不用断开,只需要更换流动相连着一起冲洗即可
2、高比例水相冲洗过后,纯有机相冲洗色谱柱,这个纯有机相冲洗有没有时间要求?------------------------------------------没有时间上的硬性要求,要求有两点,一是尽可能的使色谱柱充满有机相,二是尽可能的将色谱柱内残留物冲洗出来。
顺带提一下高水相、高有机相冲洗时间都是不定的要根据具体的实际情况来做,例如色谱柱柱长、粒径、进样样品类型、化合物等,宝典里的30min只是个参考值
guoguoguog
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原文由 歌名(Ins_eedcdc41) 发表:
、上面提到的“冲洗”是需要将色谱柱出口端卸下,断开检测器吗?--------------------------------不用断开,只需要更换流动相连着一起冲洗即可
2、高比例水相冲洗过后,纯有机相冲洗色谱柱,这个纯有机相冲洗有没有时间要求?------------------------------------------没有时间上的硬性要求,要求有两点,一是尽可能的使色谱柱充满有机相,二是尽可能的将色谱柱内残留物冲洗出来。
顺带提一下高水相、高有机相冲洗时间都是不定的要根据具体的实际情况来做,例如色谱柱柱长、粒径、进样样品类型、化合物等,宝典里的30min只是个参考值
好的,谢谢
houjjun
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“冲洗”时不用断开与检测器连接,断开是防止有严重的污染物冲出来污染检测器,这个污染物能有多严重,即使能从色谱柱冲出来,就不会污染到检测器。
冲洗时间没有具体要求,一般二三十分钟,具体得看冲洗情况,如果第二天或近期还使用,少冲洗一会也行,如果较长时间不会用最好多冲洗一会,保证色谱柱内的残留物完全冲洗出来
xiaolanzi5
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严格讲高水相冲洗时不必断开检测器,因为从柱子到检测器这段还有初始流动相(缓冲盐)。高有机相冲洗时还是建议切换到废液。高有机相一般冲洗20-30个柱体积时间,至于一个柱体积多长时间,我一般根据溶剂峰的时间来粗略判断,在一定流速下,把溶剂出峰时间看作一个柱体积时间。
Insm_8dfe3106
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xx_dxd_xx
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纯甲醇冲洗的时间不定,与样品脏不脏有关,一般说的二十到三十分钟只是参考。我习惯开着检测器冲,观察基线,基线平就是冲干净了
Emp丶
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高比例的水相写反了吧,甲醇:水=10:90吧?90%甲醇,有盐的话柱子不就堵了?
液相色谱柱修复
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