主题：【原创】液体乳及含乳蛋白饮料中三聚氰胺的测定分析方法

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发表于：2023/02/08 11:34:10 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

液体乳及含乳蛋白饮料中三聚氰胺的测定分析方法

三聚氰胺(Mela mine)是一种三嗪类含氮杂环有机化合物，是一种有害物质，现归属于2B类致癌物质，其结构式为 ,103,

，在常温下极其稳定。三聚氰胺进入人体后，造成肾脏损害，极易引起肾结石。在食品安全监督抽检细则中，卫生部、工业和信息化部、农业部、工商总局质检总局公告2011年第10号规定了三聚氰胺的最大允许限量为2.5 mg/kg，按照GB/T 22388原料乳与乳制品中三聚氰胺检测方法进行检验，保证食品安全。

本方法以高效液相色谱仪为基础，选择纳谱分析的反相色谱柱ChromCore C18 5μm, 4.6×250mm，以固相萃取柱进行净化，检测液体乳和含乳蛋白饮料中三聚氰胺的含量，经实验验证，该色谱柱的分离度、灵敏度以及柱效良好，满足国际检测要求，其加标回收达到85%-100%，满足标准要求。

2 材料

2.1 仪器

2.1.1高效液相色谱仪（带有紫外检测器）

2.1.2离心机

2.1.3超声机

2.1.4固相萃取装置

2.1.5氮气吹干仪

2.2 试剂和试剂配制

2.2.1乙腈：色谱纯

2.2.2 1%三氯乙酸：称取10 g三氯乙酸，置于1 L容量瓶中，用超纯水定容至刻度，混匀

2.2.3柠檬酸

2.2.4辛烷磺酸钠

2.2.5离子对试剂缓冲液：称取2.10 g柠檬酸、2.16 g辛烷磺酸钠，加入约950 mL超纯水，调pH为3.0，定容至1000 mL

2.2.6 5%氨化甲醇：量取5 mL氨水和95 mL甲醇于100 mL量筒中，混匀后备用

3 实验步骤

3.1 样品前处理

3.1.1 提取

称取样品2 g于50 mL具塞离心管中，加入15 mL 1%三氯乙酸和5 mL乙腈，涡旋1 min，超声2 min，6500 r/min离心5 min，准确吸取上清液25 mL容量瓶中，并用1%三氯乙酸定容至刻度，混匀，准确移取5 mL液体于50 mL具塞离心管中，加入5 mL超纯水混匀待净化。

3.1.2 净化

活化：先后用3 mL甲醇、3 mL超纯水

上样：将3.1.1待净化液体

洗涤：先后用3 mL超纯水、3 mL甲醇

洗脱：6 mL 5%氨化甲醇

将洗脱液进行氮气吹干，残留物用1 mL流动相定容，过滤膜，待上机测定

3.2 仪器条件

3.2.1色谱条件

色谱柱：ChromCore C18 5μm，4.6×150mm

流动相：离子对试剂缓冲液-乙腈(9：1，v/v)，等度洗脱

柱温：35 ℃

进样量：20 μL

波长：240 nm

3.3 色谱图

使用离子对试剂缓冲液-乙腈(9：1，v/v)为配制试剂，配制标准工作液，浓度点分别为0.5、1、2、5、10、20 μg/mL，得到标准曲线，使用ChromCore C18 (150mm×4.6,5um)得到的色谱图，其分离度和峰型均良好，达到标准要求，其谱图如下：

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