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液相色谱（LC）

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主题：【已应助】柱子堵了求助各位大佬！

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发表于：2023/02/23 14:18:05 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

这是一根比较新的柱子只进过我的样品安捷伦poroshell300SB C18 工作时是37乙腈:73磷酸二氢钾13.6g/L 1.3流速
我检测完样品后，把盐换成了水还是按照37:63冲了50min 1.3流速然后换成50:50冲了40min 换到70乙腈的时候过了一会柱压开始升高
我的样品是大分子多肽类 4000多道尔顿溶于水不溶于乙腈
因为我连有预柱所以预柱堵得更严重柱子也堵了这些天试过反冲预柱（只冲预柱），0.1%三氟乙酸加到水里冲柱子；热水冲柱子；10%异丙醇冲柱子进样DMSO；预柱反冲过；柱子也反冲过（一个上午）
请问各位大佬们我还能怎么做啊堵的是盐还是高保留物质啊

推荐答案：检测老菜鸟回复于2023/02/23

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2023/2/23 15:19:54 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

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2023/2/23 15:32:49 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

有于预柱的先把预柱拆下来，看看柱压是不是正常的，一般的话会先堵塞预柱，，如果拆了预柱柱压正常的话就正常换一个预柱就好了，如果拆了预柱柱压还是异常，使用5%乙腈水-三氟酸20mM反冲，筛板也可以拆下来用酸水超一下，再安装回去反冲，如果这都不行就直接放弃吧

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Ins_d68f5961

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2023/2/23 15:33:23 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 检测老菜鸟(v3295053) 发表:这是一根比较新的柱子只进过我的样品安捷伦poroshell300SB C18 工作时是37乙腈:73磷酸二氢钾13.6g/L 1.3流速我检测完样品后，把盐换成了水还是按照37:63冲了50min 1.3流速然后换成50:50冲了40min 换到70乙腈的时候过了一会柱压开始升高我的样品是大分子多肽类 4000多道尔顿溶于水不溶于乙腈因为我连有预柱所以预柱堵得更严重柱子也堵了这些天试过反冲预柱（只冲预柱），0.1%三氟乙酸加到水里冲柱子；热水冲柱子；10%异丙醇冲柱子进样DMSO；预柱反冲过；柱子也反冲过（一个上午）请问各位大佬们我还能怎么做啊堵的是盐还是高保留物质啊一般情况除非堵快死了，要不然别反冲，我建议你用45?纯水冲，不连检测器，只用水冲，盐和高保留物质都差不多可以溶于热水。

谢谢！我现在是在用90的水和10的异丙醇冲我的柱子不耐水不太敢用纯水水是从水浴锅里直接连进去的水浴锅开到了70度进去的水应该能有30.40度从早上冲到现在了也没啥好转中间进样了好几次dmso

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2023/2/23 15:41:00 地毯管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 歌名(Ins_eedcdc41) 发表:有于预柱的先把预柱拆下来，看看柱压是不是正常的，一般的话会先堵塞预柱，，如果拆了预柱柱压正常的话就正常换一个预柱就好了，如果拆了预柱柱压还是异常，使用5%乙腈水-三氟酸20mM反冲，筛板也可以拆下来用酸水超一下，再安装回去反冲，如果这都不行就直接放弃吧

请问这样大概需要冲多久啊其实现在水里加了三氟乙酸但是水在加热三氟乙酸可能会挥发谢谢您

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