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主题：【已应助】HPLC测定血清中类胡萝卜素水平，但存在一种目标物浓度越低反而出峰面积越大

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发表于：2023/08/01 16:36:37 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
?求助各位老师，我现在在用HPLC测定血清中6种类胡萝卜素水平，分别绘制了甲醇中的标准曲线和胎牛血清中的基质加标曲线，采用了5个梯度浓度，但是有一种目标物的出峰面积很奇怪，在甲醇中的出峰面积是随着浓度递减而递增，胎牛血清中的出峰面积则更无规律可言，请问这是出了什么问题呢？?
推荐答案：hujiangtao回复于2023/08/07
估计这个峰不是目标物，胡萝卜素类属于分子量大的非极性物质，对色谱柱和流动相条件要求苛刻，多查一些文献，再重新优化下流动相梯度程序看看能不能找到正确的目标物峰
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xiaolanzi5
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2023/8/1 21:52:34 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
很怀疑那个没规律的峰是不是真正的目标物。
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hujiangtao
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2023/8/7 9:03:30 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
估计这个峰不是目标物，胡萝卜素类属于分子量大的非极性物质，对色谱柱和流动相条件要求苛刻，多查一些文献，再重新优化下流动相梯度程序看看能不能找到正确的目标物峰
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2023/8/10 15:16:44 Last edit by hujiangtao
趙庭晟
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2023/8/7 9:15:14 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
有可能这个峰不是你的目标物，建议用标准物质找一下条件
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Ins_1bbf2185
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2023/8/19 11:21:46 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 hujiangtao(hujiangtao) 发表:估计这个峰不是目标物，胡萝卜素类属于分子量大的非极性物质，对色谱柱和流动相条件要求苛刻，多查一些文献，再重新优化下流动相梯度程序看看能不能找到正确的目标物峰
好的谢谢老师！番茄红素那个峰挺好辨认的，周围没有其他杂峰，但是峰形是分叉峰，不知道是什么问题。我把异常点去掉之后r2是0.969，现在隔壁课题组老师让我确认一下血清里各目标物的浓度是否在我绘制的标准曲线范围内，看番茄红素的浓度是否需要再提高一点，我不太明白那位老师是啥意思，因为我毫无实验基础，也没有师兄师姐带，可以麻烦老师指导一下老师是啥意思嘛，打扰了TT
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