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液相色谱（LC）
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主题：【已应助】液相色谱

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发表于：2023/12/28 10:50:08 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
求助：最近在用液相测甜菜碱，所用的色谱柱是C18柱，检测波长是195nm，流动相是乙腈-水（90-10），标品是用纯甲醇溶解。但是在检测过程中发现有两个峰，随着样品浓度增加，这两个峰都的峰面积都增加。所以想向各位前辈请教一下，我该如何区分那个是我的样品峰呢？
推荐答案：通标小菜鸟回复于2023/12/28
楼主首先确定一下空白溶剂里有没有干扰峰出来，确保空白无干扰，然后考虑两个峰都是来源于标品。楼主可以参考一下标准方法或者其它文献里面，确认一下该物质是出一个峰，还是两个峰。如果其它人做都出一个峰，那么还有一个峰可能是标品不纯，可以重新购买一个来源的标品重新配制。还有就是将LC条件照搬到LCMS上，走MS根据MS图谱来确定哪个是目标物，哪个是干扰峰。
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通标小菜鸟
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2023/12/28 14:53:47 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
楼主首先确定一下空白溶剂里有没有干扰峰出来，确保空白无干扰，然后考虑两个峰都是来源于标品。楼主可以参考一下标准方法或者其它文献里面，确认一下该物质是出一个峰，还是两个峰。如果其它人做都出一个峰，那么还有一个峰可能是标品不纯，可以重新购买一个来源的标品重新配制。还有就是将LC条件照搬到LCMS上，走MS根据MS图谱来确定哪个是目标物，哪个是干扰峰。
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myoldid
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2023/12/28 19:17:14 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
上个图看看吧，可以先试试用乙腈+水：90+10，也就是你的流动相来溶解标品。峰分裂为两个，一是溶剂效应，用流动相稀释标品即可。二是死体积，现象是所有的峰都分为两个，需要重新连接管路。三是柱子污染或柱头塌陷，现象也是所有峰峰叉，需要换柱子
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xiaolanzi5
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2023/12/28 23:00:55 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
初始流动相配标液可能会解决这个问题。再一个建议用氨基柱跑甜菜碱。
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hujiangtao
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2023/12/30 20:18:50 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
可能峰分裂了，甜菜碱极性强，可以考虑Hillic模式
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Ins_0e171c8c
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2024/1/3 16:51:25 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 myoldid(v2963297) 发表:上个图看看吧，可以先试试用乙腈+水：90+10，也就是你的流动相来溶解标品。峰分裂为两个，一是溶剂效应，用流动相稀释标品即可。二是死体积，现象是所有的峰都分为两个，需要重新连接管路。三是柱子污染或柱头塌陷，现象也是所有峰峰叉，需要换柱子
第一张图是溶剂纯甲醇的色谱图，第二张图是
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2024/1/3 16:53:54 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 Ins_0e171c8c(Ins_0e171c8c) 发表:第一张图是溶剂纯甲醇的色谱图，第二张图是
第二张图是加了标品的，可以看见甲醇峰有变形，然后旁边多出一个很明显的峰，但是随着标品浓度增加这两个峰面积都增加，所以不太确定那个峰是目标物
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尖峰勇士
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2024/1/4 7:08:44 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
这个项目一般用氨基柱
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