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核磁共振技术（NMR）
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主题：请教高手，如何用核磁检测蛋白质的结构

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xin913xin
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发表于：2006/03/12 23:03:00 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
请教高手，如何用核磁检测蛋白质的结构
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2006/3/12 23:20:00 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
非常麻烦，要做一系列的二维三维的谱图，HSQC，TROSY等等，光是解谱也得几个月
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2006/3/14 22:57:00 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
没必要把谱全解开吧？抓住几个特征峰不就省事多了？
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dearfish
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2006/3/15 0:35:00 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
而且也不单是做C谱和H谱。北京核磁中心就专门做这个的，你可以去他们主页看看
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rdc
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2006/3/28 0:30:00 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
一般分子量五六千以下的多肽或者小蛋白,记一些两维的同核谱就可以,cosy,tocsy,noesy等都是必须的,这些谱综合起来完成化学位移认证和距离约束的认证;
对于分子量接近一万的蛋白,同核谱解的难度已经相当大了,这时需要做N标,C标或者N,C双标,然后记一些三共振实验,通过CBCACONH-CBCANH,HNCO-HNCACO等成对的实验完成主链认证,然后根据HBHACONH,CCCONH,HCCCONH,HCCHCOSY,HCCHTOCSY等实验进行侧链化学位移的归属,最后根据N15-NOESY和C13NOESY得到的距离信息进行结构计算;
对于分子量2万以上的蛋白,由于分子量太大,弛豫时间变短,线宽增加,还需要做氘标,利用TROSY效应,偶极耦合等方法得到更多的信息.
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