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主题：【求助】检测血浆中的谷氨酸？

浏览0 回复8 电梯直达
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发表于：2007/11/14 10:12:00 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
将血液离心，再用水杨酸离心去除蛋白后的血清为出发材料。定性和定量检测血液中谷氨酸的含量。初步估计约有200个样品。

1、选用已有的氨基酸分析柱的柱子？目前市场有分析氨基酸的柱子和相应的试剂盒。首先是微柱萃取，然后衍生，再走柱子。不过这套系统代价太高，我们想自己摸索试剂盒。柱子我们是可以承受购买的。约20000rmb.

2、其他的柱子？如C18或其他等等柱子，柱子的购买应该不成问题，只要合适的方案，成本不是特别高（每个样品成本50rmb以内），都可以承受。

备注：可选仪器：HPLC的检测器为紫外和荧光，Agilent1100和waters－600e

目前我考虑的是方案2，[/size]利用其他通用的柱子，摸索两个主要条件：
a：不衍生谷氨酸检测：利用改变流动相，确定谷氨酸出峰时间，要求在次条件下能够区别出其他氨基酸

b：常规的衍生，然后再摸索流动相。。


希望大家能够给一些建议和资料，谢谢！！！
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2007/11/14 16:46:00 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
不衍生化估计很难做哦，至少要单标衍生化。
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xulinshou9742
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2007/11/14 21:31:00 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
用紫外和荧光一定要衍生，普通反相色谱柱很难分离。
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2007/11/14 21:41:00 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 easyboy 发表:
不衍生化估计很难做哦，至少要单标衍生化。



感谢版主建议啊。。不过柱子方面有没有什么版主比较喜欢的建议？？？采用普通柱如C18？还是购买比较专业的分析氨基酸的柱子？？
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2007/11/14 21:45:00 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 xulinshou9742 发表:
用紫外和荧光一定要衍生，普通反相色谱柱很难分离。




普通反相柱很难分离？？？楼上的是否建议应该采用氨基酸分析柱？？
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2007/11/19 9:08:00 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
再次向大家求助了！！！！！
希望诸位高人能够不吝赐教啊！！！！
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xiaomity
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2007/11/19 12:39:00 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
Agilent的聚乙二醇柱子可以不用衍生，直接做氨基酸，检测器IR.氨基柱是用来做糖可以，但不如专业做糖的柱子。用氰基柱，紫外210nm，磷酸盐做流动相，好像可以不做衍生
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hongxia0608
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2008/3/18 16:34:54 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
大家好，我想请教一下，氨基酸测试中柱前衍生的条件是什么，我们现在用液相色谱测试时采用的色谱条件是怎样的，谢谢大家！急盼得到大家的帮助！
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2008/3/18 18:18:34 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 hongxia0608 发表:
大家好，我想请教一下，氨基酸测试中柱前衍生的条件是什么，我们现在用液相色谱测试时采用的色谱条件是怎样的，谢谢大家！急盼得到大家的帮助！

我们做的就是直接衍生后上机，条件就是加衍生剂55摄氏度下十分钟就可以了，方法上都有，方法是WATERS建的，柱子用的资深堂的，条件改变不大，感觉挺不错。
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