主题:【讨论】为什么蛋白质检测要用凯氏氮

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Oliver
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大家有点相关常识就知道凯氏氮的缺点,不法商人也就凭这个缺点钻了空子,以至于到今天这个地步。以前是往牛奶里面加尿,发觉味道不行了又想出这个三聚氰胺。
其实其他蛋白质检测方法准确灵敏简单快捷的非常多,我就想不通为什么过时的东西还在用。
N年前我做毕业论文的时候也牵涉到蛋白质检测,那时用的是考马斯亮蓝G-250(Coomassie brilliant blue G-250)法。很简单很迅速啊。

资料:
考马斯亮蓝G-250测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。考马斯亮蓝G-250在游离状态下呈红色,最大光吸收在488nm;当它与蛋白质结合后变为青色,蛋白质-色素结合物在595nm波长下有最大光吸收。其光吸收值与蛋白质含量成正比,因此可用于蛋白质的定量测定。蛋白质与考马斯亮蓝G-250结合在2min左右的时间内达到平衡,完成反应十分迅速;其结合物在室温下1h内保持稳定。该法是1976年Bradford建立,试剂配制简单,操作简便快捷,反应非常灵敏,灵敏度比Lowry法还高4倍,可测定微克级蛋白质含量,测定蛋白质浓度范围为0~1 000μg/mL,是一种常用的微量蛋白质快速测定方法。
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爱杰杰
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lz8215353
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标准这东西不是说改就改的,背后涉及到多大的利益,我们这些普通人是不知道的
zhuxiugao
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jason19784
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) 注意经常性的校准和检测。

有毒有害气体检测仪也同其它的分析检测仪器一样,都是用相对比较的方法进行测定的:先用一个零气体和一个标准浓度的气体对仪器进行标定,得到标准曲线储存于仪器之中,测定时,仪器将待测气体浓度产生的电信号同标准浓度的电信号进行比较,计算得到准确的气体浓度值。因此,随时对仪器进行校零,经常性对仪器进行校准都是保证仪器测量准确的必不可少的工作。需要说明的是:目前很多气体检测仪都是可以更换检测传感器的,但是,这并不意味着一个检测仪可以随时配用不同的检测仪探头。不论何时,在更换探头时除了需要一定的传感器活化时间外,还必须对仪器进行重新校准。另外,建议在各类仪器在使用之前,对仪器用标气进行响应检测,以保证仪器真正起到保护的作用。

2)注意各种不同传感器间的检测干扰。

一般而言,每种传感器都对应一个特定的检测气体,但任何一种气体检测仪也不可能是绝对特效的。因此,在选择一种气体传感器时,都应当尽可能了解其它气体对该传感器的检测干扰,以保证它对于特定气体的准确检测。

3) 注意各类传感器的寿命:

各类气体传感器都具有一定的使用年限,即寿命。一般来讲,在便携式仪器中,LEL传感器的寿命较长,一般可以使用三年左右;光离子化检测仪的寿命为四年或更长一些;电化学特定气体传感器的寿命相对短一些,一般在一年到两年;氧气传感器的寿命最短,大概在一年左右。电化学传感器的寿命取决于其中电解液的干涸,所以如果长时间不用,将其密封放在较低温度的环境中可以延长一定的使用寿命。固定式仪器由于体积相对较大,传感器的寿命也较长一些。因此,要随时对传感器进行检测,尽可能在传感器的有效期内使用,一旦失效,及时更换。

4)注意检测仪器的浓度测量范围:

各类有毒有害气体检测器都有其固定的检测范围。只有在其测定范围内完成测量,才能保证仪器准确地进行测定。而长时间超出测定范围进行测量,就可能对传感器造成永久性的破坏。

比如,LEL检测器,如果不慎在超过100%LEL的环境中使用,就有可能彻底烧毁传感器。而有毒气体检测器,长时间工作在较高浓度下使用也会造成损坏。所以,固定式仪器在使用时如果发出超限信号,要立即关闭测量电路,以保证传感器的安全。

表常见气体传感器的浓度检测范围、分辨率、允许浓度和最高承受浓度(ppm)

传感器 检测范围 分辨率 TWA 最高浓度

一氧化碳        0-500 1 25 1500

硫化氢          0-100 1 10 500

二氧化硫        0-20 0.1 2 150

一氧化氮        0-250 1 25 1000

氨气            0-50 1 25 200

氨化氢          0-100 1 10 100

氮气            0-10 0.1 0.5 30

VOC              0-10000 0.1 - 无限制

总之,有毒有害气体检测仪是保证工业安全和工作人员健康的有力工具。我们要根据具体的使用环境场合以及需要的功能,选择合适的气体检测仪。目前,可供我们选择的检测仪包括固定式/便携式、扩散式/泵吸式、单气体/多气体、无机气体/有机气体等等多种多样的组合。只有选择好了合适的气体检测仪器,才能真正做到事半功倍,防患于未然。

 
初学者&九点虎
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国外凯氏定氮用了几百年了,没出现三聚氰胺的问题,不是标准有问题,是中国不法商人制作聪明,标准只是手段
sas311
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汾阳王
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原文由 zhouyuhu 发表:
国外凯氏定氮用了几百年了,没出现三聚氰胺的问题,不是标准有问题,是中国不法商人制作聪明,标准只是手段


完全同意!再好的方法和标准,再先进的仪器都只能起到辅助作用,而这种不自觉的人你再怎么更新标准,改变方法都是防不胜防!
千雪子
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标准就是要求用凯氏定氮啊,不能偏离标准啊,偏离了没有人认可这数据啊
SOMS课题组
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考法也是对高含量的测定的,低含量存在离子干扰问题,凯式定氮唯一好处就是因为蒸馏,这样干扰就比较少,国际公认为比较准确的方法!!但凯式定氮有个缺点,就是只能测高含量,低含量滴定比较麻烦,检出浓度比较高!!建议可以在定氮上做些改进,考法属于光谱定氮,但应该干扰比较严重,目前用的不多,我们建议用其他铵氮的显色体系,比如在666波长处直接显色,灵敏度就比凯式定氮和考法高出很多倍数!!
aimee_cy
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