主题:【求助】做大肠杆菌的伊红美兰琼脂出问题怎么办??

浏览0 回复11 电梯直达
zmxorhhxa
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这段时间我们配制的伊红美兰琼脂在灭菌冷却后发生变质分层的问题~~ 那位DX碰到过这样的问题,怎么解决哈~~ 
表现为:配制过程无异常,不灭菌冷却,没问题~~ 灭菌冷却后发生变质分层,再煮沸溶解后倒至平皿不能凝固~~  那位DX来救命哈~~
推荐答案:小不董回复于2009/04/15

趁热摇匀后取出,冷却。
补充答案:

去年冬天回复于2009/04/15

1. 这个肯定是溶解完全并且摇匀了的~~
2。我们的灭菌器较大降压降温不太容易。。。 都是头一天下午灭菌好后等第二天再取出装冰箱。不知其它实验室是不是灭菌完了当时取出~~
3。琼脂在没灭菌前凝固的非常好也不会出现分层的问题,但灭菌后第二天取出就出现分层,再次煮沸溶解会出现无法溶解的问题,个人感觉好象是出现了变质了。。。。

培养基是不是过期了
楼主从新买瓶试试吧

活到九十 学到一百回复于2009/04/14

琼脂的问题!!!

老多_小多回复于2009/04/14

检查下灭菌温度是否正确

wukv88888回复于2009/04/15

应该不会吧,不凝固就是琼脂的问题,会不会是量加少了啊?我遇到过灭菌后溶液颜色不均匀,但倒平板没问题。

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小不董
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原文由 zmxorhhxa 发表:
这段时间我们配制的伊红美兰琼脂在灭菌冷却后发生变质分层的问题~~ 那位DX碰到过这样的问题,怎么解决哈~~ 
表现为:配制过程无异常,不灭菌冷却,没问题~~ 灭菌冷却后发生变质分层,再煮沸溶解后倒至平皿不能凝固~~  那位DX来救命哈~~

灭菌的时候出问题,灭菌过程不正确
活到九十 学到一百
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老多_小多
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zmxorhhxa
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原文由 doxw0323 发表:
灭菌的时候出问题,灭菌过程不正确

我们的灭菌程序及试剂都没变哈,以前怎么做的现在就怎么做~~~以前做的很好,现在无论怎么调整都不行,即便把从0.165MPA泄压到关闭电源的灭菌时间加长到2小时以上还是不行~~~

如保检查灭菌温度??  我们的就一压力表和安全阀控制~~  压力表上每次都是在0.16MPA泄压,然后稳定在0.15MPA上放气~~
wukv88888
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应该不会吧,不凝固就是琼脂的问题,会不会是量加少了啊?我遇到过灭菌后溶液颜色不均匀,但倒平板没问题。
去年冬天
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121 ℃ 高压灭菌 15min ,冷至50℃ 时倾倒无菌平皿

压力0.1就可以了
去年冬天
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1,先把琼脂加热溶解完全,再灭菌。就不会分层了。
2,或者灭菌完成后趁热把培养基摇匀,也不会分层。
3 生产厂家的琼脂问题:这种琼脂的强度较大,密度也就大,所以灭完菌后是沉在下层的,有分层的现象。
建议灭菌后摇匀后再倾注平皿!!
zmxorhhxa
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原文由 7336167 发表:
1,先把琼脂加热溶解完全,再灭菌。就不会分层了。
2,或者灭菌完成后趁热把培养基摇匀,也不会分层。
3 生产厂家的琼脂问题:这种琼脂的强度较大,密度也就大,所以灭完菌后是沉在下层的,有分层的现象。
建议灭菌后摇匀后再倾注平皿!!

1. 这个肯定是溶解完全并且摇匀了的~~
2。我们的灭菌器较大降压降温不太容易。。。 都是头一天下午灭菌好后等第二天再取出装冰箱。不知其它实验室是不是灭菌完了当时取出~~
3。琼脂在没灭菌前凝固的非常好也不会出现分层的问题,但灭菌后第二天取出就出现分层,再次煮沸溶解会出现无法凝固的问题,个人感觉好象是出现了变质了。。。。
去年冬天
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1. 这个肯定是溶解完全并且摇匀了的~~
2。我们的灭菌器较大降压降温不太容易。。。 都是头一天下午灭菌好后等第二天再取出装冰箱。不知其它实验室是不是灭菌完了当时取出~~
3。琼脂在没灭菌前凝固的非常好也不会出现分层的问题,但灭菌后第二天取出就出现分层,再次煮沸溶解会出现无法溶解的问题,个人感觉好象是出现了变质了。。。。

培养基是不是过期了
楼主从新买瓶试试吧
zmxorhhxa
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没有过期,最近的一瓶是今天三月生产的。。。而且换了几瓶都这样~~不知道哈米回事~~
你们做这个是灭菌完了立即取出还是第二天冷却后再取出?? 谢谢
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