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扫描电镜（SEM/EDS）
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主题：【求助】扫描电镜和透射电镜的区别，最好附图

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shikesay
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发表于：2010/01/13 09:06:03 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
请问各位高手，扫描电镜和透射电镜的区别，最好附图
我想做细胞形态观察，应该用哪一种方法？谢谢！！！
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syning90
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2010/1/13 11:04:33 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
扫描电镜观察的是样品表面的形态，而透射电镜是观察样品结构形态的。两者大体上结构一样，只是程序原理上不尽相同。

一般情况下，透射电镜放大倍数更大，真空要求也更高。楼主的应用从理论上说，两个都可以，因为你看得倍数也不是很大，如果想看病毒一类的，则需要使用放大倍数更大的透射电镜。生物样品的样品制备其实也是很讲究的。
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半开的门
feblo
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2010/1/13 11:09:29 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
通俗的说
扫描电镜是相当与对物体的照相 得到的是表面的 只是表面的 立体三维的图象
因为扫描的原理是“感知”那些物提被电子束攻击后发出的此级电子
而透射电竟就相当于普通显微镜 只是用波长更短的电子束替代了会发生衍射的可见光 从而实现了显微  是二维的图象 会看到表面的图象的同时也看到内层物质 就想我们拍的X光片似的 内脏骨骼什么的都重叠着显现出来
总结就是透射虽然能看见内部但是不立体
        扫描立体但是不能看见内部 只局限与表面
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rainflying666
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2010/1/13 19:39:33 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
好好学习一下，目前只做过SEM，还没有做过透射电镜，不过也是对表面分析知识的一个拓展了，以后不能做SEM或SEM做效果不好的，可以建议客户用TEM做！
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shikesay
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2010/1/14 17:10:21 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
扫描电镜和透射电镜的样品处理方法一样吗？还请高手们的耐心讲解
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驰奔
srd2009
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2010/1/14 19:26:25 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
扫描和透射的根本原理不同，
扫描不是实像，而是通过信号拟合形成的一级近似图形。
透射电镜类似光学显微镜，是有“光线"通过样品和透镜形成的实像。

扫描电镜靠样品表面反射信号，类似于漫反射，测器器逐点接收后转化放大处理形成图像，一般看形貌像是最常用的，

透射电镜是电子透过样品，在经过样品时发生散射，散射中的主要有用信号透射电子带有内部结构信信息！将所有透过样品的电子束通过多级磁透镜放大成像。电子穿透能力比x射线低非常多，只能穿透微米 纳米级别厚度的样品。
下图是细胞合成图，看你要观察哪里？看细胞表面用sem ；看细胞内部用TEM ，只能看某个截面的结构，要想三维拟合，需要把一个细胞平行切成n多片，每一个切片都要看象，可以还原成细胞的内部实际结构形态。





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驰奔
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2010/1/14 20:05:25 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊

2003年我国数字化可视人体研究获得重大突破
数字化可视人是人类借助计算机技术认识自身之谜的重大进步，目前只有中国、美国和韩国掌握了人体可视化技术。这一技术是将无数个人体断面数据信息在计算机里整合重建成人体的三维立体结构图像，构成人体形态学信息研究的实验平台，为医学、生命科学等的研究和应用提供基础与技术支撑，为人类的病因研究、疾病诊断和治疗等提供精确量化的计算模型。此外，数字化可视人体数据集还可广泛应用于航天、航空、军事、建筑、影视、体育等领域。
一是全身切片总数达１８２００片，国内外同类研究报道为数千片，在切片总数上提高了一个数量级。二是全身切片厚度均为０．１毫米，比国内外同类研究报道的０．２毫米的切片精度提高了一倍。三是断面图像数码摄影分辨率为１１００万像素，而同类研究最高像素为６００多万。四是每个断面图像文件大小为６２．８兆字节，总数据量达１１４３千兆字节，这是迄今为止国内外数字化可视人体研究方面所获得的最大数据量。五是灌注血管标识精度比已有报道提高了２至３倍，能清晰显示管径为０．２毫米的小血管。
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syning90
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2010/1/15 8:28:39 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 shikesay(shikesay) 发表:
扫描电镜和透射电镜的样品处理方法一样吗？还请高手们的耐心讲解

两者样品制备有比较大的区别，其实也可以说二者看的样品差距比较大，扫描电镜可以看比较“大”的样品，最大可以达到直径200mm以上，高度80mm左右，而透射电镜的样品只能放在直径3mm左右的铜网上进行观察。所以透射电镜的样品制备往往需要切的很小很薄，要不电子束也打不透。

另外，由于扫描电镜是通过探测二次电子或背散射电子，所以样品的导电性非常重要，而且绝对不能含有水分和磁性。TEM的样品其实也应该导电性良好，但我了解的也仅限于此，听说一个好的TEM生物样品，要经过切片，干燥，冷冻，等等很多步骤，往往要制备一个星期左右，所以很有技术含量，也希望高手进来介绍一下。
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shikesay
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2010/1/15 18:25:37 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
多谢各位的帮助，能不能把具体的样品处理步骤和注意事项介绍一下？
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驰奔
srd2009
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2010/1/15 23:56:44 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 shikesay(shikesay) 发表:
多谢各位的帮助，能不能把具体的样品处理步骤和注意事项介绍一下？

论坛里有，请使用搜索功能。
确实也需要了解，至少样品要保鲜！
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驰奔
srd2009
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2010/1/16 22:37:44 11楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
扫描电镜只看表面现象，适合细胞形态学研究，当然如果有谁有本事把细胞核解剖出来，sem也可以看细胞核或者细胞器的形态，这个解剖难度比较大，就不如透射电镜。
透射电镜把你切成千万片，片片看透，里里外外全了解！

现在生物学研究，需要大量的精确数据用于数字化可视研究。因此TEM现在也有3D功能，就是基于切片技术，大量图像拟合，可以看到表面形态，细胞膜的厚度，细胞的内部精细结构。
如果仅仅为了做细胞形态学研究，用TEM 3D技术实在是成本太高，而且也非常没必要！
以上是本人粗浅理解，
楼主做到什么级别了，给大家介绍介绍？我是生物盲，这个论坛也需要比较生动活泼的话题

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