主题：【原创】【讨论】【第二届网络原创作品】庖丁解药（二）------深度剖析中药注射剂的制备过程

中药注射剂是传统中医药理论与现代生产工艺相结合的产物，突破了中药传统给药方式。中药注射液至今诞生已经70多年了，因其药效迅速、作用可靠、生物利用度高等特点，被广泛应用于各种疾病的治疗当中，成为现代中药剂型的重要发展方向之一。不少业内人士认为，中药注射液将成为我国制药产业进军国际市场的潜在优势项目。但是近几年中药注射剂不良反应频发，导致目前的中药注射剂研究处于一个停滞不前的状态！据报道中药注射液的不良反应约占涉及到品种的10%！任何事物都是具有两面性，我们要正确的加以认识！药品都存在某种不良反应和风险，国内外、中西药均无例外。据国家药物不良反应中心统计，药物不良反应从数量及严重性看，前十位都是已经临床应用几十年，甚至上百年的抗生素品种，但权衡利弊至今仍在应用。我们要从临床总体效果来判断药品的安全、有效性，而中药注射剂几十年的临床实践已经充分证实了这一点。先了解这样一组数据：全国现有400多家企业生产109种中药注射剂，在全国临床应用较广！所以说中药注射剂不是没有前途的！只要我们利用现代高科技技术对其质量和安全性进行深入的研究和客观的评价，我相信中药注射剂会很快走出低谷！中药注射剂在实际医疗中利大于弊，它在发展过程中遇到的问题，要用发展的观点与办法解决。与国外企业相比，我们在中药产业发展方面有独到优势，国家应该鼓励企业加强研究，不断完善和提高产品质量，这是给我国中药产业发展提供机会。千万不要让我们已付出很大代价的中药注射剂变成外企叩开我国中药市场大门的‘金砖’。来源：《瞭望》新闻周刊
首先了解一下中药注射剂的定义：《中国药典》一部的定义是“系指药材经提取、纯化后制成的供注入体内的溶液、乳状液及供临用前配制成溶液的粉末或浓溶液的无菌制剂。 《中药药剂剂》的定义：是“以中医药理论为指导，采用现代科学技术和方法，从中药或复方中药中提取有效物质制成的注射剂称为中药注射剂。《中药注射剂学》的定义：是“中药注射剂是指以中医药理论为指导，采用现代科学技术和方法，从中药或天然药物的单方或复方中提取的有效物质制成的无菌溶液、混悬液或临用前配成溶体的灭菌粉末供注入体内的制剂”。 著名学者周超凡研究员提出以下定义：中药注射剂一般系指在中医药理论与经验的基础上，采用现代科学技术与方法，从中药或其他天然药中提取有效物质制成，功能主治用中医药术语或同时用中医药术语与相关的西医药术语联合表述的供注人体内的各种无菌制剂。值得注意的是定义中最重要的部分——“功能主治用中医药术语或同时用中医药术语与相关的西医药术语联合表述”，这是“注射剂”属概念下“中药注射剂”种概念所特有，必不可少；“一般系指在中医药理论与经验的基础上”，讲明了大多数中药注射剂的渊源，尽管这样做有助于中药注射剂的研制，但并不是非如此不可；中药注射剂的原料药一般属于中药，但不排斥用其他天然药，因为中药本身也是在不断发展变化，曾有不少外来天然药早已被吸纳为中药；只有“采用现代科学技术与方法”才能保证质量，它虽不属于“中药注射剂”所特有，但应强调。（出处：周超凡,等. 从药物组成看中药注射剂. 中国中药杂志。

下来进入正题，了解一下中药注射剂的制备过程。


（一）    原辅料的准备：
1、注射用水的制备：注射用水为蒸馏水或去离子水经蒸馏所得的水，故又称重蒸馏水。其质量要求在《中国药典》中有严格规定，除氯化物、硫酸盐、钙盐、硝酸盐、亚硝酸盐、二氧化碳、易氧化物、不挥发物与重金属按蒸馏水检查应符合规定外，还规定pH应为5.0～7.0，氨含量不超过0.00002%，热原检查应符合规定，并规定应于制备后12h内使用。注射用水可通过蒸馏法、反渗透法、超过滤器法等获得，各国对注射用水的生长方法作了十分明确的规定，如：①美国药典规定“注射用水必须由符合美国环境保护协会或欧共体或日本法定要求的饮用水经蒸馏或反渗透纯化而得”。　②欧洲药典规定“注射用水为符合法定标准得饮用水或纯化水经适当方法蒸馏而得。中国药典规定“本品（注射用水）为纯化水经蒸馏所得的水“。制备方法有：
①传统的蒸馏法

　②现代的蒸馏法

　
注射用水系统的日常管理
　　制水系统的日常管理包括运行、维修，它对验证及正常使用关系极大，所以应建立监控、预修计划，以确保水系统的运行始终出于受控状态。这些内容包括：
　　①制水系统的操作、维修规程；
　　②关键的水质参数和运行参数的监测计划，包括关键仪表的校准；
　　③定期消毒／灭菌计划；
④水处理设备的预防性维修计划；
⑤关键水处理设备（包括主要的零部件）、管路分配系统及运行条件便更的管理方法。

2、包括药材的提取纯化，基本和前面讲的颗粒剂一致，只不过注射剂要求更高一些，如提取需用纯水、提取后要进行纯化处理已达到所需纯度
3、成型工艺所用辅料：包括使用的溶剂、助溶剂和增溶剂、抗氧剂和抗氧增效剂、pH值调节剂、渗透调节、膨松剂、局部疼痛减轻剂等！根据实际情况选用以上辅料！供注射用的原辅料，必须符合《中国药典》2005年版所规定的各项杂质检查与含量限度。某些品种，可另行制定内控标准。在大生产前，应做小样试制，检验合格方可使用。对有时不易获得专供注射用的原料，但医疗上又确实需要，必须用化学试剂时，应严格控制质量，加强检验，特别是水溶性钡、砷、汞等有毒物质，还应进行安全试验，证明无害并经有关部门批准后方可使用。配制前，应正确计算原料的用量，称量时应两人核对。若在制备过程中（如灭菌后）药物含量易下降，应酌情增加投料量。含结晶水药物应注意其换算。投料量可按下式计算：
 
成品标示量百分数通常为100%，有些产品因灭菌或储藏期间含量会有所下降，可适当增加投料量（即提高成品标示量的百分数）。原料（附加剂）用量=实际配液量×成品含量%。实际配液量=实际灌注量＋实际灌注时损耗量。

（二）注射容器的处理
1．安瓿的种类和式样  注射剂容器一般是指由硬质中性玻璃制成的安瓿或容器（如青霉素小瓶等），亦有塑料容器。
2．注射剂玻璃容器应达到以下质量要求：①应无色透明，以利于检查药液的澄明度、杂质以及变质情况；②应具有低的膨胀系数、优良的耐热性，使之不易冷爆破裂；③熔点低，易于熔封；④不得有气泡、麻点及砂粒；⑤应有足够的物理强度，能耐受热压灭菌时产生的较高压力差，并避免在生产、装运和保存过程中所造成的破损；⑥应具有高度的化学稳定性，不与注射液发生物质交换。
3．安瓿的检查  为了保证注射剂的质量，安瓿必须按药典要求进行一系列的检查，包括物理和化学检查。物理检查内容主要包括：安瓿外观、尺寸、应力、清洁度、热稳定性等；化学检查内容主要有容器的耐酸、碱性和中性检查等。装药试验主要是检查安瓿与药液的相容性，证明无影响方能使用。
4．安瓿的切割与圆口  安瓿需先经过切割，使安瓿颈具有一定的长度，便于灌药与安装。切割后的安瓿应瓶口整齐，无缺口、裂口、双线，长短符合要求。切口不好，玻璃碎屑易掉入安瓿，增加洗瓶的难度，影响澄明度。安瓿割口后，颈口截面粗糙，再相互碰撞及洗涤时容易落入安瓿内，因此需要圆口。圆口系利用强烈火焰喷烘颈口截面，使熔融光滑。
5．安瓿的洗涤  安瓿一般使用离子交换水灌瓶蒸煮，质量较差的安瓿须用0.5%的醋酸水溶液，灌瓶蒸煮（100℃、30min）热处理。蒸瓶的目的是使得瓶内的灰尘、沙砾等杂质经加热浸泡后落入水中，容易洗涤干净，同时也是一种化学处理，让玻璃表面的硅酸盐水解，微量的游离碱和金属盐溶解，使安瓿的化学稳定性提高。
6．安瓿的干燥与灭菌  安瓿洗涤后，一般置于120～140℃烘箱内干燥。需无菌操作或低温灭菌的安瓿在180℃干热灭菌1.5h。大生产中多采用隧道式烘箱，主要由红外线发射装置和安瓿传送装置组成，温度为200℃左右，有利于安瓿的烘干、灭菌连续化。

（三）注射液的配制与过滤
1．注射液的配制 
（1）配制用具的选择与处理：常用装有搅拌器的夹层锅配液，以便加热或冷却。配制用具的材料有：玻璃、耐酸碱搪瓷、不锈钢、聚乙烯等。配制浓的盐溶液不宜选用不锈钢容器；需加热的药液不宜选用塑料容器。配制用具用前要用硫酸清洁液或其他洗涤剂洗净，并用新鲜注射用水荡洗或灭菌后备用。操作完毕后立即刷洗干净。
（2）配制方法：分为浓配法和稀配法两种。将全部药物加入部分溶剂中配成浓溶液，加热或冷藏后过滤，然后稀释至所需浓度，此谓浓配法，此法可滤除溶解度小的杂质。将全部药物加入所需溶剂中，一次配成所需浓度，再行过滤，此谓稀配法，可用于优质原料。
（3）注意事项：①配制注射液时应在洁净的环境中进行，一般不要求无菌，但所用器具及原料附加剂尽可能无菌，以减少污染；②配制剧毒药品注射液时，严格称量与校核，并谨防交叉污染；③对不稳定的药物更应注意调配顺序（先加稳定剂或通惰性气体等），有时要控制温度与避光操作；④对于不易滤清的药液可加0.1%~0.3%活性炭处理，小量注射液可用纸浆混炭处理。使用活性炭时还应注意其对药物（如生物碱盐等）的吸附作用，要通过加炭前后药物含量的变化，确定能否使用。活性炭在酸性溶液中吸附作用较强，最高吸附能力可达1∶0.3，在碱性溶液中有时出现“胶溶”或脱吸附，反而使溶液中杂质增加，故活性炭最好用酸碱处理并活化后使用。
2．注射液的过滤  注射液的滤过靠介质的拦截作用，其过滤方式有表面过滤和深层过滤。表面过滤是过滤介质的孔道小于滤浆中颗粒的大小，过滤时固体颗粒被截留在介质表面，如滤纸与微孔滤膜的过滤作用。深层过滤是介质的孔道大于滤浆中颗粒的大小，但当颗粒随液体流入介质孔道时，靠惯性碰撞、扩散沉积以及静电效应被沉积在孔道和孔壁上，使颗粒被截留在孔道内。
（1）影响过滤的因素：假定过滤时液体流过致密滤渣层的间隙，且间隙为均匀的毛细管聚束，此时液体的流动遵循Poiseuile公式：
                                                             
式中，V—过滤容量；P—操作压力；r—流过层中毛细管半径；L—毛细管长度；η—液体粘度。V/t即为过滤速度，由此可知影响过滤速度的因素有：①操作压力越大，滤速越快；②孔隙越窄，阻力越大，滤速越慢；③过滤速度与滤器的表面积成正比（这是在过滤初期）；④粘度愈大，滤速愈慢；⑤滤速与毛细管长度成反比，因此沉积的滤饼量愈多，滤速愈慢。
根据以上因素，增加滤速的方法有：①加压或减压以提高压力差；②升高滤液温度以降低粘度；③先进行预滤，以减少滤饼厚度；④设法使颗粒变粗以减少滤饼阻力等。
（2）滤介质与助滤剂：过滤介质亦称滤材，为滤渣的支持物。过滤介质的种类很多，其性质不同，用途及效率也不同。过滤介质应由惰性材料制成，既不与滤液起反应，也不吸附或很少吸附滤浆中的有效成分；耐酸、耐碱、耐热，适用于过滤各种溶液；过滤阻力小、滤速快、反复应用易清洗；应具有足够的机械强度；价廉、易得。常用的过滤介质有：
1）滤纸：分为普通滤纸和分析用滤纸，其致密性与孔径大小相差较大。普通滤纸孔径为1~7μm，常用于少量液体制剂的过滤。经环氧树脂和石棉处理的为α-纤维素滤纸，其强度和过滤性能均有所提高。
2）脱脂棉：过滤用的脱脂棉应为长纤维，否则纤维易脱落，影响滤液的澄清，适用于口服液体制剂的过滤。
3）织物介质：包括棉织品（纱布、帆布等）常用于精滤前的预滤；丝织品（绢布），既可用于一般液体的过滤，也可用于注射剂的脱碳过滤；合成纤维类（尼龙、聚酯等）耐酸碱性强，不易被微生物污染，常用做板框压滤机的滤布。
4）烧结金属过滤介质：系将金属粉末烧结成多孔过滤介质，用于过滤较细的微粒。如以钛粉末烧结的滤器，用于注射剂的初滤。
5）多孔塑料过滤介质：系将聚乙烯、聚丙烯等用烧结法制备的管状滤材，优点是化学性质稳定、耐酸碱、耐腐蚀，缺点是不耐热。孔径有1、5、7μm等，其中1μm可用于注射剂的过滤。
6）垂熔玻璃过滤介质：系将中性硬质玻璃烧结而成的孔隙错综交叉的多孔型滤材。广泛用于注射剂的过滤。
7）多孔陶瓷：用白陶土或硅藻土等烧结而成的筒式滤材，有多种规格，主要用于注射剂的精滤。
8）微孔滤膜：是高分子薄膜过滤材料，厚度为0.12~0.15μm，孔径从0.01~14μm，有多种规格。包括醋酸纤维素酯膜、硝酸纤维素酯膜、醋酸纤维酯和硝酸纤维酯的混合膜、聚氯乙烯膜、聚酰胺膜、聚碳酸酯膜等。微孔滤膜主要用于注射剂的精滤和除菌过滤。特别使用于一些不耐热产品，如胰岛素、辅酶等。此外还可用于无菌检查，灵敏度高，效果可靠。
若滤浆中含有极细微粒时，在过滤介质上形成一致密的滤饼而堵塞孔道，使过滤无法进行；另外在滤浆中含有粘性或高度可压缩性颗粒时，形成的滤饼对滤液的阻力很大。此时可将某种质地坚硬的，能形成疏松滤渣层的另一种固体颗粒加入滤浆中，或将其制成糊状物铺于过滤介质表面，用以形成较疏松的滤饼，使滤液得以畅流，此固体颗粒称为助滤剂。其作用就是减少过滤的阻力。
常用的助滤剂有：①硅藻土，主要成分为二氧化硅，有较高的惰性和不溶性，是最常用的助滤剂；②活性炭，常用于注射剂的过滤，有较强的吸附热原、微生物的能力，并具有脱色作用。但它能吸附生物碱类药物，应用时应注意其对药物的吸附作用；③滑石粉，吸附性小，能吸附溶液中过量不溶性的挥发油和色素，适用于含粘液、树胶较多的液体。在制备挥发油芳香水剂时，常用滑石粉作助滤剂。但滑石粉很细，不易滤清；④纸浆，有助滤和脱色作用，中药注射剂生产中应用较多，特别用于处理某些难以滤清的药液。

（3）过滤装置：过滤装置主要有：
1）一般漏斗类：常用的有玻璃漏斗和布氏漏斗，常用滤纸、长纤维的脱脂棉以及绢布等做过滤介质，适用于少量液体制剂的预滤，如脱碳过滤等。
2）垂熔玻璃滤器：分为垂熔玻璃漏斗、滤器及滤棒三种。按过滤介质的孔径分为1~6号，生产厂家不同，代号亦有差异。国内几家厂家生产的垂熔玻璃滤器规格见表3-6。
表3-6 国产垂熔玻璃滤器规格比较
上海玻璃厂    长春玻璃厂    天津滤器厂
滤器号    滤板孔径/μm    滤板号    滤板孔径/μm    滤棒号    滤棒孔径/μm
1    80～120    G1    20～30    1G1    80～120
2    40～80    G2    10～15    1G2    40～80
3    15～40    G3    4.5～9    1G3    15～40
4    5～15    G4    3～4    1G4    5～15
5    2～5    G5    1.5～2.5    1G5    2～5
6    ＜2    G6    ＜1.5    1G6    ＜2

3号和G2号多用于常压过滤，4号和G3号多用于减压或加压过滤，6号以及G5、G6号作无菌过滤用。
垂熔玻璃滤器的优点是化学性质稳定（强碱和氢氟酸除外）；吸附性低，一般不影响药液的pH；易洗净，不易出现裂漏，碎屑脱落等现象。缺点是价格高，脆而易破。使用时可在垂熔漏斗内垫上一稠布或滤纸，可防污物堵塞滤孔，也有利于清洗，可提高滤液的质量。这种滤器，操作压力不得超过98.06kPa（1kg/cm2），可热压灭菌。垂熔漏斗使用后要用水抽洗，并以1%~2%硝酸钠硫酸液浸泡处理。
3）砂滤棒：国产的主要有两种，一种是硅藻土滤棒，另一种是多孔素瓷滤棒。硅藻土滤棒质地疏松，一般适用于粘度高、浓度大的药液。根据自然滤速分为粗号（500ml/min以上）、中号（500～300ml/min）、细号（300ml/min以下）。注射剂生产常用中号。多孔素瓷滤棒质地致密，滤速比硅藻土滤棒慢，适用于低粘度的药液。
砂滤棒价廉易得，滤速快，适用于大生产中粗滤。但砂滤棒易于脱砂，对药液吸附性强，难清洗，且有改变药液pH现象，滤器吸留滤液多。砂滤棒用后要进行处理。
4）板框式压滤机：由多个中空滤框和实心滤板交替排列在支架上组成，是一种在加压下间歇操作的过滤设备。此种滤器的过滤面积大，截留的固体量多，且可在各种压力下过滤。可用于粘性大、滤饼可压缩的各种物料的过滤，特别适用于含少量微粒的滤浆。在注射剂生产中，多用于预滤用。缺点是装配和清洗麻烦，容易滴漏。
5）微孔滤膜过滤器：以微孔滤膜作过滤介质的过滤装置称为微孔滤膜过滤器。常用的有圆盘形和圆筒形两种，圆筒形内有微孔滤膜过滤器若干个，过滤面积大，适用于注射剂的大生产。
6）其他：另外还有超滤装置、钛滤器、多孔聚乙烯烧结管过滤器等。
在注射剂生产中，一般采用二级过滤，先将药液用常规的滤器如砂滤棒、垂熔玻璃漏斗、板框压滤器或加预滤膜等办法进行预滤后才能使用滤膜过滤，即可将膜滤器串联在常规滤器后作末端过滤之用。但还不能达到除菌的目的，过滤后还需灭菌。

（四）注射液的灌封
滤液经检查合格后进行灌装和封口，即灌封。封口有拉封与顶封两种，拉封对药液的影响小。如注射用水加甲红试液测pH值为6.45，灌装于10ml安瓿中，分别用拉封与顶封，再测pH值时，拉封为pH6.35，顶封为pH5.90。故目前都主张拉封。粉针用安瓿或具有广口的其他类型均采用拉封。
灌封操作分为手工灌封和机械灌封两种。手工灌封常用于小试，药厂多采用全自动灌封机，安瓿自动灌封机因封口方式不同而异，但它们灌注药液均由下列动作协调进行：安瓿传送至轨道，灌注针头上升、药液灌装并充气，封口，再由轨道送出产品。灌液部分装有自动止灌装置，当灌注针头降下而无安瓿时，药液不再输出而污染机器与浪费。我国已有洗、灌、封联动机和割、洗、灌、封联动机，生产效率有很大提高。但灭菌包装还没有联动化。
灌装药液时应注意：①剂量准确，灌装时可按《中国药典》附录要求适当增加药液量，以保证注射用量不少于标示量。根据药液的粘稠程度不同，在灌装前，必须用精确的小量筒校正注射器的吸液量，试装若干支安瓿，经检查合格后再行灌装；②药液不沾瓶，为防止灌注器针头“挂水”，活塞中心常有毛细孔，可使针头挂的水滴缩回并调节灌装速度，过快时药液易溅至瓶壁而沾瓶；③通惰性气体时既不使药液溅至瓶颈，又使安瓿空间空气除尽。一般采用空安瓿先充惰性气体，灌装药液后再充一次效果较好。有些药厂在通气管路上装有报警器以检查充气效果，也可用CY-2型测氧仪检测残余氧气。
在安瓿灌封过程中可能出现的问题有：剂量不准，封口不严（毛细孔）、出现大头、焦头、瘪头、爆头等，应分析原由及时解决。焦头主要因安瓿颈部沾有药液，熔封时炭化而致。灌药室给药太急，溅起药液在安瓿瓶壁上；针头往安瓿里灌药时不能立即回缩或针头安装不正；压药与打药行程不配合等都会导致焦头的产生。充CO2时容易发生瘪头、爆头。对于出现的各个问题，应逐一分析原因，然后予以解决。

（五）注射液的灭菌与检漏
1、灭菌  除采用无菌操作生产的注射剂外，一般注射液在灌封后必须尽快进
行灭菌，以保证产品的无菌。注射液的灭菌要求是杀灭微生物，以保证用药安全；避免药物的降解，以免影响药效。灭菌与保持药物稳定性是矛盾的两个方面，灭菌温度高、时间长，容易把微生物杀灭，但却不利于药液的稳定，因此选择适宜的灭菌法对保证产品质量甚为重要。在避菌条件较好的情况下生产可采用流通蒸气灭菌，1~5ml安瓿多采用流通蒸气100℃、30min；10~20ml安瓿常用100℃、45min灭菌。
2．检漏  灭菌后的安瓿应立即进行漏气检查。若安瓿未严密熔合，有毛细孔或微小裂缝存在，则药液易被微生物与污物污染或药物泄漏，污损包装，应检查剔除。检漏一般采用灭菌和检漏两用的灭菌锅将灭菌、检漏结合进行。灭菌后稍开锅门，同时放进冷水淋洗安瓿使温度降低，然后关紧锅门并抽气，漏气安瓿内气体亦被抽出，当真空度为640~680mmHg（85326~90657Pa）时，停止抽气，开色水阀，至颜色溶液（0.05%曙红或亚甲蓝）盖没安瓿时止，开放气阀，再将色液抽回贮器中，开启锅门、用热水淋洗安瓿后，剔除带色的漏气安瓿。也可在灭菌后，趁热立即放颜色水于灭菌锅内，安瓿遇冷内部压力收缩，颜色水即从漏气的毛细孔进入而被检出。深色注射液的检漏，可将安瓿倒置进行热压灭菌，灭菌时安瓿内气体膨胀，将药液从漏气的细孔挤出，使药液减少或成空安瓿而剔除。还可用仪器检查安瓿隙裂。

（六）中药注射剂的质量控制
（一）杂质或异物检查
1、澄明度检查：
2、色泽检查：与比色对照液进行对比。
3、pH值检查：注意中药药液色泽深，对结果有影响。用PH试纸法或酸度计。一般应4.0～9.0之间，个别特定品种按其质量标准执行。同一品种PH值差异范围不能超过±1.0。
4、蛋白质检查：
　　取注射液lml，加新鲜配制的30%磺基水杨酸试液lml混合，不得显浑浊。如注射液含有遇酸能产生沉淀的成分，如：黄芩素、蒽醌类等，则可改加鞣酸试液1～3滴。
5、鞣质检查：
　　取注射液lml，加新鲜配制的1%鸡蛋清生理盐水溶液5mL。放置10分钟，不得出现浑浊或沉淀。
6、重金属检查：按常规检查，一般不得超过20×10-6；
7、砷盐检查：
8、草酸盐检查：
　　草酸进入血液，可使血液脱钙，产生抗血凝作用。生成的草酸钙结晶，可引起血栓，危及病人生命。因此，中药注射剂，特别是静脉注射液应进行此项检查。
　　检查方法：取注射液lml，加3%氯化钙试液1～2滴，放置10分钟，不得出现浑浊成沉淀。
　 9、钾离子检查：钾离子浓度在一般静脉注射液中应控制在22%（mg/ml）以下。
10、树脂检查：
11、炽灼残渣检查：炽灼残渣试验时，l～5ml装的注射液，依药典法检查一般应在0.7%～1.5%的范围内。
（二）安全性检查
安全试验的项目有：急性毒性试验、亚急性及长期毒性试验、溶血试验、局部刺激性试验及过敏性试验等。卫生部《新药审批办法》及有关的配套文件中，对新研制的注射剂有明确的要求、规定和方法，应严格遵照执行。对具体品种而言，可根据药物性质、作用用途、功能主治、用药方法及用药剂量等具体情况，参照药政管理有关规定，选择必做的项目进行试验。
  1、急性毒性试验：
  2、刺激性试验：有的对人体眼睛、粘膜、肌肉等组织有刺激性，使用药部位的组织坏死或变性。分局部刺激性试验与血管刺激性试验。
  3、溶血试验：
  4、过敏试验：
（三）所含成分的检测
注射液中有效成分含量的高低直接影响到疗效和用药安全，所以注射液都应有含量测定的方法及标准，特别是含毒性成分的注射剂更不可缺少。但是，至今尚有某些中药注射剂的有效成分不明确，只能暂时用下述方法控制：
①采用生物检定的方法，利用药物的疗效或药理作用（例如：抗菌、泻下、强心、升压、降压、降血糖、收缩子宫、止咳、平喘、祛痰等）加以控制；
②选择通常认为有生理活性的物质（如：生物碱、黄酮苷、挥发油等）作为定性或定量控制的指标。方法：比色法、荧光法、重量法、中和法、紫外分光光度法、薄层扫描法、气相色谱法、高效液相色谱法。
1、总固体含量测定
2、有效成分或有效部位含量测定：扣除注射剂中附加剂的加入量，所测有效成分或有效部位的量应不低于总固体量的70%（iv，80%）。
3、指标成分含量测定：测定有代表性的有效成分、指标成分或总类成分（如总多糖）的含量。扣除注射剂中附加剂的加入量，所测成分的总量应不低于总固体量的20%（iv，25%）。
4、含量表示方法：
以有效成分或有效部位为组分的注射剂含量均以标示量的上下限范围来表示。
以净药材为组分的注射剂含量以限量表示。
含毒性药味时，必须确定有毒成分的限量范围。
组分含有化药的，单独测定化药的含量，从总固体中扣除，不计算在含量内。
中药注射剂指纹图谱研究。

(七)三大问题讨论及应对
出现问题的原因：原料成分的复杂性，中药材品种、产地、所含成分的不确定性，处方组分和剂量的特殊性，制备工艺与分析技术的不规范性。问题如下：
（一）澄明度问题
在灭菌后或在贮藏过程中产生浑浊或沉淀，出现澄明度不合格。
１、去除杂质：
杂质前处理中除不尽，温度、PH变化时，成分聚合变性，溶液出现浑浊；有些成分本身不稳定，制备或贮藏过程中发生水解、氧化使澄明度发生变化。采用合适方法除去。
２、调节药液PH值：成分的溶解性与PH有关。
3、采取热处理冷藏法：加速胶体杂质的凝结滤过。
4、合理选用注射剂的附加剂：增溶剂、助溶剂或混合溶剂。
5、超滤技术
（二）刺激性问题：使用过程中出现，限制其应用范围扩大。
1、消除有效成分本身的刺激性：不影响疗效的情况下，可降低药物浓度、调整PH值或酌情加止痛剂。对于刺激性强的药物，可改变剂型或改变注射方式消除刺激性。
2、去除杂质：鞣质、高浓度钾离子产生刺激性。
3、调整药液的PH值： 产生局部刺激作用。
4、调整药液渗透压：等渗溶液。
（三）疗效问题：疗效不稳定，原因为药材质量的差异，组方的配伍、用药剂量、提取与纯化方法是否合理。
1、控制原料质量：来源、产地、采收、加工炮制等方面的差异。
2、调整剂量优化工艺：新技术、新方法。
3、提高有效成分溶解度：增加溶解度的办法。
从原料、处方组成及工艺条件改进入手，解决以上问题。

(八)例子:柴胡注射液(bupleuri injection)  本品为柴胡挥发油的灭菌溶液，用于流行性感冒的解热止痛。
【处方】北柴胡 (主药)                      1000g
氯化钠  （等渗调节剂）            8.5g
吐温-80  （增溶剂）                10ml
注射用水  加至                    1000ml
【制备】取柴胡（饮片或粗粉）1000 g 加10倍量的水，加热回流6h后蒸馏，收集初蒸馏液6000 ml 后，重蒸馏至1000 ml。含量测定（276nm处光密度为0.8）后，加氯化钠和吐温-80，使全部溶解，过滤、灌封，100℃灭菌30 min即得。
【处方及其工艺分析】
（1）本品所用原料为伞形科柴胡属植物。
（2）柴胡根及果实中含微量挥发油并含脂肪酸约2%，挥发油为柴胡醇。
（3）柴胡中挥发油用一般蒸馏法很难提尽，故先加热回流6h后二次蒸馏，使得组织细胞中的挥发油在沸腾状态下溶于水中，提高了含量。重蒸馏后的残液还可套用于下批药材。
（4）吐温-80为非离子型表面活性剂，对挥发油的增溶效果并不强，可用丙二醇代替。
（5）也可以将柴胡重蒸馏后的蒸馏液用乙醚抽提，乙醚液经无水硫酸钠脱水后，回收乙醚，得到柴胡油，将柴胡油溶于注射用油重配成4%的柴胡油注射液。