2.2干扰因素的考察
在本实验中,甲醇和醋酸的用量、样品质量和离心时间对测定产生了较大的干扰。设计正交试验,采用四因素三水平的正交设计表进行试验设计,分别以甲醇体积、醋酸体积、样品质量和离心时间为因素进行试验,结果见下表:
表1 正交试验数据及结果分布
序号 甲醇(mL) 醋酸(mL) 样品质量(g) 离心时间(min) Abs
1 14 1.5 1.5 8 0.255
2 14 2.0 2.0 10 0.256
3 14 2.5 2.5 12 0.258
4 16 1.5 2.0 12 0.27
5 16 2.0 2.5 8 0.273
6 16 2.5 1.5 10 0.259
7 18 1.5 2.5 10 0.243
8 18 2.0 1.5 12 0.275
9 18
18 2.5
2.5 2.0
2 8 0.265
Ⅰj 0.256 0.256 0.263 0.264
Ⅱj 0.267 0.268 0.264 0.253
Ⅲj 0.261 0.261 0.258 0.268
极差 0.011 0.012 0.006 0.015
经试验,试验5的效果最好,所以采用试验5中介质为试验介质,其甲醇为16mL,醋酸为2mL,样品质量为2.5g,离心时间为8min。
2.3精密度
取四份酸奶样品,每份3g,按试验方法用二阶导数紫外分光光度测定其中纳他霉素的含量,测定结果见表二.由表二得,此法测定纳他霉素的精密度较高,重现性较高.
表二 样品中纳他霉素测定结果
样品名称 测定值(mg/kg) 平均值(mg/kg) RSD(%)
酸奶1 0.268,0.284,0.272,0.282,0.291,0.275,0.286 0.280 0.76
酸奶2 0.321,0.385,0.364,0.377,0.329,0.384,0.375 0.362 2.44
酸奶3 3.548,3.007,3.264,3.398,3.452,3.388,3.671 3.390 1.97
2.4回收率试验
对已知纳他霉素含量的酸奶样品进行回收率试验,测定数据见表三.
表三 样品中纳他霉素的回收率试验结果
样品编号 本底值(mg/kg) 加标量(mg/kg) 测定值(mg/kg) 回收率
(%)
酸奶1 0.280 0.5 0.781 100.26
酸奶2 0.362 0.5 0.832 94.07
酸奶3 3.390 2.0 5.343 97.65
由表三可知,该法测定纳他霉素的回收率为94.07%-100.26%.
2.5检出限
根据中华人民共和国国家标准GB/T5009.1-2003[4]和IUPAC的规定,测定16个试剂空白,计算纳他霉素的检出限为0.0986mg/kg.
3结论
采用导数光谱法测定酸奶中的纳他霉素,检出限低,准确性高,而且有效的消除了其他物质对纳他霉素测定的干扰,适合于酸奶中纳他霉素的测定.