饮茶在我们国家有着悠久的历史了,而绿茶也是我们日常生活中特别常见的一种了。在之前的应用中呢我们带大家一起检测了普洱茶中的黄曲霉毒素,那么绿茶中是否也含有黄曲霉毒素呢?我们一起来看看具体的检测过程吧~
适用范围适用于茶叶中黄曲霉的测定(本实验基质为绿茶)。
参考标准:GB 5009.22-2016 食品安全国家标准 食品中黄曲霉毒素B族和G族的测定。
提取步骤称取2g(±0.05g)试样,加入10mL甲醇:水(7:3)溶液,振荡2min,超声15min,离心5min(6000r/min),移取4mL上清液,加入12mLPBS带净化。
SPE净化步骤SPE柱:月旭黄曲霉毒素免疫亲和柱(3mL)
1)回温解冻:提前半个小时将黄曲霉毒素免疫亲和柱从冰箱拿出常温解冻;
2)上样:准确移取 15mL 提取好的样品溶液注入免疫亲和柱,使溶液以1滴/S 的速度通过免疫
亲和柱,直至2mL-3mL空气通过柱体,弃去流出液;
3)淋洗:用10mL水淋洗免疫亲和柱,流速为1 滴/s---2 滴/s,淋洗两次。直至空气进入免疫
亲和柱,直至2mL-3mL空气通过柱体,弃去全部的流出液,抽干小柱;
4)洗脱:准确加入1.0mL甲醇洗脱,流速约为1 滴/s,收集全部的洗脱液于干净的离心管中,
用甲醇-水(45/55)定容至2mL,过0.22μm滤膜供
液相色谱测定。
色谱条件色谱柱:月旭Ultimate® XB-C18 4.6×150mm,5μm;
流动相:甲醇:水=45:55;
流速:1.0mL/min;
柱温:30℃;
进样量:20μL;
检测波长:Ex=360nm ,Em=420nm。
谱图和数据图1.黄曲霉毒素混标1μg/L图谱
图2.样品加标1μg/kg过柱图谱
表1.加标回收表
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