近期接触到奶粉、液态奶中三聚氰胺项目的检测,采用的方法是GB/T 22388-2008中第二法——
液质串联法,下面总结一下所遇到的问题及解决思路,希望大家可以一起探讨指教。
一、前处理方面
1.1 待测样品中蛋白沉淀不够测定
GB/T 22388-2008中第二法的前处理过程为待测样品加入8mL的1%三氯乙酸加2mL乙腈,去除蛋白和提取待测液,涡旋高速离心后(9000r/min)。部分待测样品仍然十分浑浊,尤其是奶粉样品,导致后期的滤纸过膜和过柱难以进行。
解决思路:1)对离心后仍浑浊的样品上清,进行过0.45μm的水膜;已试过,效果不好
2)改变提取液和蛋白沉淀的浓度和种类。如a.提高三氯乙酸的浓度,增加至3%或者5%;b.改变三氯乙酸和乙腈的比例;c.增加蛋白沉淀剂亚铁氰化钾和乙酸锌。
1.2 空白样品有干扰
大部分实验中所做的空白,均能检出三聚氰胺,但其含量很低,一般为几个PPm左右。
解决思路:对整个实验过程进行排除。1)整个过程中的试管均换为全新的试管;2)进行过柱与未过柱样品之间的比较,来判断是否由柱子引入的干扰。
1.3 外标曲线的线性不好
因目前手上暂无空白的基质样品,所以是采用的试剂标准曲线,发现奶粉和液体乳样品的基质效应很强,且为抑制效应。
解决思路:已采购13C3三聚氰胺同位素,来进一步地进行定量。
近期12月中旬会开始会这些问题进行一一优化和思路验证,后期会把结果一一附上。同时也希望大家可以提出宝贵的意见和经历。