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主题：【已应助】求解说液质流动相梯度

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发表于：2024/09/08 06:17:50 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
各位老师，能帮我解说一下这样的流动相梯度，每个阶段的流动相的目的是什么吗？是怎样的一个出峰过程，谢谢。
推荐答案：hujiangtao回复于2024/09/10
一般液质流动相一个大梯度就可以了，初始有机相比例低是为了让极性强的物质保留时间不要太早（很多共流出杂质干扰），几分钟线性升高到高比例有机相让待测组分根据极性强弱依次出峰，后面保持高比例有机相一段时间清洗色谱柱上的如蛋白等大分子基质，后面恢复到初始有机相比例平衡色谱柱等待下一针进样
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2024/9/10 13:35:42 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
一般液质流动相一个大梯度就可以了，初始有机相比例低是为了让极性强的物质保留时间不要太早（很多共流出杂质干扰），几分钟线性升高到高比例有机相让待测组分根据极性强弱依次出峰，后面保持高比例有机相一段时间清洗色谱柱上的如蛋白等大分子基质，后面恢复到初始有机相比例平衡色谱柱等待下一针进样
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zhangyongmei
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2024/9/10 16:49:53 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
流动相的梯度分正向和反向系统，我们一般常用的是反向系统，反向系统里面一般采用高水相使我们的化合物因为极性不同在色谱柱上分开（注意，很多柱子不耐纯水，一般柱子不建议用100%的水相），然后再用有机相将我们的化合物在色谱柱上洗脱下来，最后将我们的流动相比例回来初始流动相，平衡柱子。其实平衡柱子这一步也是很关键的，如果柱子平衡不好可能造成出峰早的物质重复性和峰形很差的情况。这是我们自己经历过的，希望能够帮助到你。
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