主题：【第六届原创】米粉中马拉硫磷检测方法的建立暨农药残留检测方法的趋势？

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药物分析发表于：2013/12/31 22:55:40 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

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米粉中马拉硫磷检测方法的建立暨农药残留检测方法的趋势？

最近接到一个盲样，是米粉中马拉硫磷的测定。之前建立过气相、液质的包括其他种类农药在内的方法学。米粉的基质不是特别复杂，前处理采用的主要是液液萃取。

气相的前处理方法采用了丙酮作为提取溶剂，直接向样品中加入丙酮，充分混匀后经超声萃取，高速离心取上清过膜后进样。因为事先没有向米粉中加入水，因此离心后的上清液略微浑浊，且米粉并没有聚集在一起，而是呈松散状，需要过滤膜后才能进样。气相测定农残一般会存在基质增强效应，实验中我们也发现确实存在这样的基质效应。需要对基质效应及回收率同时考察，以判断是否需要用基质溶液配制标准。结果发现，整体回收率稳定在90%以上，因此直接用标准溶液定量计算即可。

气相方法较为成熟，但其灵敏度较差，与之比较，液相色谱串联质谱仪的灵敏度就要高很多。我们同时考察了液质测定米粉中马拉硫磷的方法。

首先是建立仪器方法。采用了1.7um、50mm的C18色谱柱，流动相即乙腈、水，0~0.5min，90%水、10%乙腈，0.5~1min，水从90%变为10%，乙腈从10%变为90%，1~2.5min，保持10%水、90%乙腈，之后是初始流动相平衡色谱柱。定量离子对为331->127（碰撞能量为19伏特），定性离子对为331->99（碰撞能量为31伏特）。其他质谱参数略。

如图所示，为马拉硫磷的MRM图谱，图中标准溶液的浓度为50ng/ml，出峰时间为2min响应较好，峰面积为85903.91。

本方法的前处理与气相方法略有差异。采用的是QuEchers方法的第一步，即提取步骤。称取一定量（如5g）的样品，加入一定的水，使得米粉能够被润湿即可（具体加水量根据称样量、米粉干燥程度决定），再加入5ml乙腈，充分震荡混匀1min，入4g无水硫酸钠（换为无水硫酸镁，以减少发热）、1g氯化钠，加入后立即手动混匀，高速离心5分钟，取上清进样分析。

下图是离心后的两个离心管，因为事先加入了水，因此在离心后的米粉是凝结在一起的，上清液较澄清，同时可观察到上清液与米粉之间还有一层水层。

实验中同样考察了基质效应，将加标浓度为50ng/g（进样浓度为50ng/ml）的米粉加标样、用空白米粉的提取液配制的50ng/ml的基质加标溶液以及上述50ng/ml的纯标溶液三者进行比较，判断基质效应及回收率的大小。

下图是1：1的乙腈：水的MRM图谱，出峰位置不存在干扰峰。

下图是米粉空白的图谱，在出峰位置，不存在干扰峰。

下图是50ng/g的米粉加标溶液MRM图谱，出峰时间为2min，峰面积为51059.81。与上述纯标溶液相比，回收率为60%。

那么，实验中40%的损失主要是前处理损失还是基质抑制效应？下图是空白米粉提取液配制的50ng/ml的基质加标溶液，峰面积为54071.82，回收率为63%，即有近40%的信号是在仪器上损失掉了，而就目前的理论认为，主要损失来源于基质抑制效应。因此，也可判断上述前处理的损失几乎为零。

至此，米粉中马拉硫磷的检测方法的初步建立告一段落，但却给我们留下一个问题。即农残检测的未来趋势是什么？

我们知道，现在在申请新国标或者撰写文章时都会力求同时检测多种甚至几十、几百种农药，但真正做实验的同仁应该都清楚，不太有特别周全的方法能将所有的农药都能兼顾到。因此，就给人这样的印象，食品中农残检测现行国标过老，因为大部分都是一种/一类物质一种方法，而新的国标或有些新的文献的多农残检测，让人不可信。至少在面对盲样时，不太敢用几十、几百种农残检测的方法。基本上还是要针对所涉及的项目，进行优化。这就引出一个问题，因为几十、几百种同时检测的农残方法是存在的，这样的方法是用于定量还是用于定性？

个人意见，如果是针对盲样测定，低浓度时，采用针对性的、优化过的方法，而在日常大批量样本检测时，就以定性为主，不要去苛求小数点之后的准确性，毕竟小数点后的斟酌在实际应用中并没有太大意义，因此，基于这样的想法，几十、几百种农残检测方法可不可以用于定性呢？个人意见。

另外，目前不少方法会采用基质配标准，但这里面也存在一个问题，突发事件或者盲样考核时，不能得到与样品一直的基质该怎么办？这里面是不是也可以设定一个范围，即基质效应在一定范围内的，可以认定是同一种基质？同样的，不少方法会使用到同位素内标，但因为内标的昂贵，有时不能做到每一种物质对应一个内标，尤其是在几十、几百种农药检测标准中，那么这些方法中没有一一对应的同位素内标的物质，其准确度又能如何？

欢迎各位版友提出宝贵意见，也欢迎大家对食品、水中农残检测时遇到的问题做深入的讨论。