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主题：【已应助】测定蛋白分子量

浏览0 回复8 电梯直达
carrie721
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发表于：2014/06/28 20:55:42 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我想请问一下用ESI测定蛋白分子量是要用什么作为质量分析器呢？
此外，测定蛋白分子量是用ESI好还是MALDI好呢？
然后样品是脱盐以后直接进样就可以了吗？
望解答。
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2014/6/29 8:24:10 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
应该是MALDI好一些
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daoyuanli
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2014/7/1 10:02:52 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
1.你的蛋白纯吗，纯度大概有多少？
2.你的样品在什么缓冲液中？
3.你的蛋白上有翻译后修饰吗？比如是否有糖基化位点，有几个？
4.你想得到的结果允许的误差是多大？
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八杯水
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2014/7/1 10:09:48 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
你的蛋白分子量大概范围是多少啊？
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八杯水
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2014/7/1 10:14:17 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我们这边分子量大的蛋白不是用质谱来测的。
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daoyuanli
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2014/7/2 10:01:12 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
ESI源和MALDI源都可以做，各有优势。
ESI源的质谱做的结果更加准确，但是数据处理比较复杂，需要对多电荷的质谱图进行去卷积处理才能得到分子量。
MALDI源的质谱数据更加直观，但是误差会稍微大一点。
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2014/7/2 10:03:48 Last edit by daoyuanli
xueliwu2000
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2014/7/8 18:39:09 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 daoyuanli(daoyuanli) 发表:
ESI源和MALDI源都可以做，各有优势。
ESI源的质谱做的结果更加准确，但是数据处理比较复杂，需要对多电荷的质谱图进行去卷积处理才能得到分子量。
MALDI源的质谱数据更加直观，但是误差会稍微大一点。


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sunsummer
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2014/7/17 13:14:50 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我们实验室常用ESI-TOF做蛋白质分子量测定，但ESI对于膜蛋白这样的溶解度极小的样品用Maldi-TOF更合适一些。高分辨质谱质量做的是否准确与校正有关系，ESI可实现多点校正，而Maldi-TOF通常只用某几个分子量相近的蛋白做标样，因此，ESI准确度通常要好一些。
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daoyuanli
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2014/7/20 9:08:42 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 sunsummer(sunsummer) 发表:
我们实验室常用ESI-TOF做蛋白质分子量测定，但ESI对于膜蛋白这样的溶解度极小的样品用Maldi-TOF更合适一些。高分辨质谱质量做的是否准确与校正有关系，ESI可实现多点校正，而Maldi-TOF通常只用某几个分子量相近的蛋白做标样，因此，ESI准确度通常要好一些。


专家，学习了！
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