解答:(1
)亲水色谱HILIC
(Hydrophilic Interaction LiquidChromatography
)是一种用来改善在反相色谱中保留较差的强极性物质保留行为的色谱技术。它通过采用强极性固定相,并结合高比例有机相/
低比例水相组成的流动相来实现这一目的,但本质上是可以使用反相流动相的正相色谱。(2
)HILIC
模式色谱柱综合了液液分配、离子交换和氢键作用。极性分子首先在主体流动相与色谱填料表面的半固定的高极性水膜之间发生液液分配;次级保留作用包括色谱填料表面硅醇基和/
或极性官能团与带电分析物发生的离子交换作用;氢键作用发生在带正电的分析物与带负电的表面硅醇基之间。因此,HILIC
模式色谱柱适用于含如图5-40
所示官能团的物质。(3
)目前HILIC
技术已经越来越多的被用做液相色谱方法开发策略的一部分,作为传统反相色谱技术的补充,不仅可以保留高极性化合物,还能够提供巨大的选择性差异,获得与反相分离时完全相反的洗脱顺序。因此,HILIC
模式色谱柱广泛应用在有机酸(图5-16
)、多巴胺(图5-17
)、组胺(图5-18
)、嘧啶(图5-19
)及水溶性维生素(图5-20
)等极性物质的分离中。此外,流动相的pH
在HILIC
模式中对保留和选择性的影响要比在反相分离中大很多,通过pH
调节能使结构相似的极性物质得到更好的分离度。
图5-16 HILIC模式色谱柱分离有机酸的色谱图
1—富马酸;2—草酸;3—柠檬酸
图5-17 HILIC模式色谱柱分离多巴胺的色谱图
1—苯丙醇胺;2—多巴胺;3—肾上腺素;4—左旋多巴
图5-18 HILIC模式色谱柱分离组胺的色谱图
1—组胺;2—组氨酸
图5-19 HILIC模式色谱柱分离嘧啶的色谱图
1—5-甲基脲嘧啶;2—尿嘧啶;3—腺嘌呤;4—胞嘧啶;5—鸟苷
图5-20 HILIC模式色谱柱分离水溶性维生素的色谱图
1—烟酰胺;2—维生素B7;3—维生素B6;4—维生素C;5—维生素B12;6—维生素B1领取更多《实战宝典》请进:http://instrument-vip.mikecrm.com/2bbmrpI