主题:【原创】胶体金免疫层析法原理

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胶体金免疫层析法原理
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胶体金免疫层析法(Colloidal Gold Immunochromatography Assay, CGIA)是一种简便、快速的免疫检测技术,常用于现场快速检测(POCT, Point of Care Testing)。该方法结合了免疫学反应和胶体金标记技术,可以用于检测血液、尿液、唾液等生物样本中的抗原或抗体。下面是胶体金免疫层析法的基本原理及其步骤:

原理
胶体金标记:
胶体金是由金纳米颗粒组成的悬浮液,这些金颗粒具有很强的吸收和散射光的能力,因此肉眼可见。
在胶体金免疫层析法中,抗原或抗体被标记在胶体金颗粒上,形成胶体金标记的抗体或抗原。
免疫层析:
层析纸(如硝酸纤维素膜)上预先包被有特定的捕获抗体(对于检测抗原而言)或检测抗原(对于检测抗体而言)。
当样本(如血液、尿液)滴加到试纸上时,样本中的目标分子(抗原或抗体)与标记的胶体金颗粒结合,形成复合物。
检测线和控制线:
在试纸的不同位置上预先包被有两条线:一条是检测线(Test Line, T线),另一条是控制线(Control Line, C线)。
检测线处包被的是捕获抗体或检测抗原,用于捕获样本中的目标分子与胶体金标记物形成的复合物。
控制线处包被的是另一种抗体或抗原,用于验证试验的有效性,确保胶体金标记物能够正常迁移并通过这条线。
结果解读:
如果样本中含有目标分子(抗原或抗体),则会在检测线上形成一条可见的红色或粉红色线条。
控制线上也会形成一条可见的线条,表示试验有效。
如果没有目标分子,则仅在控制线上出现一条线条。
步骤
样本准备:
将待测样本(如血清、尿液)准备好,按照说明书要求进行预处理。
试纸加载:
将样本滴加到试纸的样本垫上,让样本沿着试纸上的毛细作用移动。
反应过程:
样本中的目标分子与胶体金标记的抗体或抗原结合,形成复合物。
复合物继续移动,到达检测线时被捕获抗体或检测抗原捕获。
结果观察:
观察试纸上的检测线和控制线是否出现颜色变化。
如果两条线均出现颜色变化,则表明试验阳性;如果仅控制线出现颜色变化,则表明试验阴性;如果控制线未出现颜色变化,则表明试验无效,需要重新进行。
应用
传染病检测:如疟疾、HIV、乙肝、流感病毒等。
药物滥用检测:如吗啡、甲基苯丙胺、大麻等毒品。
食品安全:如检测食品中的抗生素残留、农药残留等。
环境监测:如检测水中的重金属离子等。
优点
快速简便:整个检测过程通常只需要几分钟,非常适合现场快速检测。
无需特殊设备:操作简单,不需要复杂的仪器设备。
高灵敏度:胶体金标记技术使得检测具有较高的灵敏度。
便携性强:试纸小巧轻便,便于携带和储存。
缺点
定量精度较低:虽然可以定性或半定量检测,但对于精确的定量分析不够准确。
可能存在假阳性和假阴性:受样本处理、操作规范等因素影响,可能会出现假阳性和假阴性结果。
胶体金免疫层析法因其简便快速的特点,在临床诊断、公共卫生、食品安全等领域得到了广泛的应用。
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