主题:【原创】活性氧的含量怎么测定

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活性氧的含量怎么测定
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在生物系统中,游离活性氧量很低,因此测定时需要灵敏的方法如脉冲射解、电子自旋共振等技术,但仪器较昂贵。由线粒体产生的H2O2,存在时间较长,能使DCFH探针的荧光物被氧化成DCF(二氯荧光素双乙酸盐),DCF可被酯酶裂解成二氯荧光素,以二氯荧光素为基础的荧光法,可检测H2O2、O2-和OH-,这种方法较简单,但特异性较低。以亚铁血红素过氧化物酶/辣根过氧化物酶催化H2O2氧化荧光物、产生荧光素的荧光法,特异性和灵敏度较高;通过测定活性氧损伤的产物如脂质过氧化物(oxLDL)和DNA损伤产物(8-羟基鸟嘌呤)等,可间接反映活性氧产量。不成对电子使H2O2,等带有顺磁共振特性,可被EPR光谱法测量,但需要特殊的设备。使用氧化还原反应中分子间能量转移,使发光氨还原后可与O2-,反应产生产物并发光,这种方法非常灵敏,已经用于测定完整细胞、单独的线粒体及线粒体亚颗粒中的O2-含量。
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