主题：【求助】高效液相色谱 基线噪声很大

测定完后没用纯甲醇冲？

原文由 emoc98311 发表:
测定完后没用纯甲醇冲？

极限噪音大有以下几方面原因
1、柱子脏，需要冲洗
2、流动相不平衡
3、泵流速不稳
4、有漏液
请逐项检查

色谱柱和色100% Hexane ★  已烷
★ 
Wear gloves 戴手套
Do not allow bed to dry 不要让底座干燥
Do not touch the column-body heat will extrude packing      不要使柱身受热,否则填料会喷出
Do not over tighten 不要旋得太紧
Female End Fitting 旋好尾端螺母
Male
从泵来的流动相                                                    保护柱                                                       

                                                                  Analytical
                                                                    Column
Filter and Guard Column Act on Sample      分析柱
          滤头和保护柱作用于样品
  Pre-Column Acts on Mobile Phase
              预柱作用于流动相                            To Detector
                                                                      到检测器

Preventing Back Pressure Problems: Sample Preparation压力问题的预防:样品制备
Solvent/Chemical Environment
溶剂/化学环境
Particulate/Aggregate Remove 
微粒/凝聚物的除去
Filter samples  过滤样品
Centrifugation  离心分离
Solid Phase Extraction(S.P.E.)  固相萃取
Cartridges or Plates  薄膜或薄层板
Disks or Membranes  圆盘或生物膜
Peak Shape Issues 峰形问题
      Split peaks  裂峰
    Peak tailing  峰拖尾
    Broad peaks  宽峰
Poor efficiency  低柱效

Many peak shape issues also combinations-I.e. Broad and tailing or 苯三胺

        pH 3.0                                              pH 7.0 
USP        QC test after cleaning
                                                                                                          100% IPA, 35ºC 
        向前方向              相反方向                  100%异丙醇冲洗后
Peak Tailing/Broadening                                Sample Load Effects峰拖尾/变宽样品过载效应
Column: 4.6 × 150mm, 5µm
Mobile Phase:40%25mM Na2HPO4,pH7.0 : 60%ACN   
Peak Broadening,Splitting Column Void  峰变宽,裂开 柱塌陷
Mobile Phase:流动相：
50%CAN : 50%Water : 0.2%TEA  (~pH 11)
50％乙腈 : 50％水 : 0。2％三乙胺  (~pH 11)
      After 30 injections                        Initial 开始时
            进样30次后

多数峰形改变可能是同一柱问题引起的。在这个例子中，高pH溶解硅胶导致塌陷
Broad Peaks Unknown “Phantom” Peaks
Column: Extend-C18, 4.6 × 150 mm, 5 µm


compounds                                  pH 4.5 显示批与批之间对碱性化合物的选择性改变
pH 3.0 shows no selectivity change from lot-to-lot, indicating silanol sensitivity at pH 4.5    pH 3.0显示批与批之间对碱性化合物的无选择性改变,表明在pH 4.5硅醇基的灵敏性
Conclusions    结论
HPLC column problem are evident as:  高效液相色谱柱问题明显的为:
High pressure  高压
不希望得到的峰形
保留时间/选择性的改变                                                   

经常遇到的这些问题不一定与柱有关,而与仪器和实验条件方面的问题有关

原文由 yankunsu 发表:

原文由 emoc98311 发表:
测定完后没用纯甲醇冲？

极限噪音大有以下几方面原因
1、柱子脏，需要冲洗
2、流动相不平衡
3、泵流速不稳
4、有漏液
请逐项检查

泵的流速调节为1.4ml/min，，泵压有点不稳，该怎么解决？

每天工作结束后，用90%甲醇-水冲30分钟。这样对系统有好处。

原文由 yangjianqin 发表:
每天工作结束后，用90%甲醇-水冲30分钟。这样对系统有好处。

我一直用的都是10%的，我试试看，谢谢