主题：【原创】【极限体验】实验嗷嗷凄惨，化合物咣咣不纯（二）(12月份)

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发表于：2011/12/04 16:59:25 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

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【发贴背景】
昨天发的贴子“实验嗷嗷顺利，新化合物咣咣出（一）”，觉得标题不错，还蛮有意思的。私下我跟人说，这个月的极限体验贴，都要采用类似的标题，所以，现在“实验嗷嗷凄惨，化合物咣咣不纯（二）”出来了。
上贴链接：http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20111203/3687561/

【实验过程】
对某西红花苷类样品进行PHPLC，期望得到1-2个单体化合物。我曾经在一个贴子中说过，此类化合物最大的特点，就是不太稳定，这个问题一直困扰着我，我相信，它也困扰着其他做这方面实验的同行，呵呵。总之，这次分离的结果不是很理想。
曾经的贴子：http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20111102/3621305/

【仪器试剂】
水：重蒸水
甲醇：色谱纯，天津大茂
液相：Waters 高效液相，Waters 996 DAD检测器，Waters Model 600 controller[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p]液相色谱[/url]

【液相色谱条件】
色谱柱：Ultimate XB-C18柱（5μm, 4.6x250mm）
流动相：保密
流速：1.0ml/min
检测波长：全波长扫描

【实验内容】
1. 总样（制备前）分析图谱（略），原因：总样一般比较杂，是用其它品牌色谱柱分析的，极限的柱子，得多多爱惜，只用来分析纯化后的样品，这一点，上贴已经强调过。

2. 制备液相时的色谱图（手机拍摄）
从图中可以看出，流分1和流分2，以及它们与其它杂质的分离度是非常好的。所以，在进行制备的时候，进样量也是相当地大，单次进样量达到3.5ml。流分1是有可能得到一个单体化合物的，尽管他右侧的小包未能完全分离开来（经验）。流分2，从理论上来说，他是肯定能成为一个单体化合物的。

3. 各流分液相分析图谱
流分1的色谱图，对于它，我早有心理准备，不纯也是正常的，毕竟右边还有那么大个没分开的小包。分析结果显示一个主峰和两个小峰，如果有Ultimate的半制备柱或者制备柱就好了，因为显示分离度挺好的。下次还得继续纯化，唉。

流分2的色谱图，居然不是单一峰形，这个非常让人失望。因为制备上面显示单一峰形，我以为能拿到至少一个单体化合物的，唉。这个样品，后续要继续纯化是非常困难的事，因为二者在50多分钟才出峰，如果要去进行制备液相将它们“拖开”，保守估计得2小时以上，而且进样量不会很大，凄惨啊！！

【小结与讨论】
1. 这次实验很失败，当然了，人为的因素不大，这作为一个安慰的借口倒是蛮不错的，呵呵。

2. 流分2继续纯化一下，是很有前途的；流分3继续纯化，是很凄惨的，很可能我就放弃了，因为这类化合物，不太可能出现新的化合物（个人经验）。

3.流分1和流分2在制备的时候，其实分得挺开的，如果有跟制备柱类似的填料，我相信，用开放ODS就可以把它们分开了。可惜。。没有！！让老板买？别开这种玩笑，谢谢啊。

4. 贴子里头讨论得差不多了，感觉很啰嗦。