客户提供了间三氟甲基苯丙醇和相关杂质I，并反馈曾尝试使用反相C₁₈柱对两化合物进行分离，但未能得到基线分离结果。现客户希望本实验室选择合适色谱柱并对色谱条件进行优化，来实现间氟甲基苯丙醇和其相关杂质I的基线分离。
首先，我们尝试使用中等极性的CAPCELLPAK C₁₈ MGII色谱柱，在磷酸盐-乙腈体系中分析50 μg/mL的混标溶液及各单标溶液，通过调整流动相中水相和有机相比例为60:40时，50 μg/mL的混标溶液中，间三氟甲基苯丙醇和杂质I能实现基线分离，分离度为1.52（见图1）。同客户沟通，客户希望供试品溶液（当间三氟甲基苯丙醇浓度为1mg/mL，杂质I为1 μg/mL）中两化合物分离度大于1.50。

图1 MGII分析混标及单标溶液结果

在此实验基础上，进一步分析供试品溶液，结果发现由于间三氟甲基苯丙醇浓度过高，致使色谱峰展宽，杂质I与间三氟甲基苯丙醇的分离度下降，未能达到1.50的基线分离要求；进一步尝试通过升高柱温来改善分离度，结果如图2，在50°C时能够得到良好分离结果，分离度为1.59。

图2 MGII分析混标及单标溶液结果

注：峰上标数字为分离度。

为有更多的选择，我们也尝试了两款非C₁₈色谱柱，包括键合特殊官能团——金刚烷基的高极性色谱柱ADME和键合五氟苯基的PFP色谱柱。在使用PFP色谱柱分析50 μg/mL混标溶液时，发现两化合物峰重合，未能实现分离。但使用ADME分析混标溶液时，能够得到1.36的分离度（见图3）。

图3 PFP、ADME分析50 μg/mL混标溶液结果

注：峰上标数字为分离度。

尝试改善分离度，继续使用ADME色谱柱进行分析，通过降低有机相比例来延长保留，最终得到了1.50的分离度（见图4），与此同时对供试品溶液进行分析，发现由于主成分峰展宽未能得到基线分离结果（见图5）。

图4 ADME分析混标溶液结果

图5 ADME分析供试品溶液结果

注：峰上标数字为分离度。

0
赞贴
1
回帖
0
收藏
0
拍砖
版主
招募

为您推荐

近期热榜

热门活动

专属顾问快速对接

获取验证码

立即提交

相关阅读

capcellpak

结帖率：

100%

关注：0 |粉丝：0

新手级：新兵

2018/4/3 10:37:56 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

综上实验结果，使用中等极性色谱柱CAPCELL PAK C₁₈ MGII S5; 4.6 mm i.d. × 250 mm（A4AD 11967），在流动相条件为0.01 mol/L磷酸二氢铵（用氨水调pH至5.8） / 乙腈 = 60 / 40、柱温为50°C时进行分析，能够在间三氟甲基苯丙醇浓度为1 mg/mL，杂质I为1 μg/mL情况下，满足两化合物间分离度大于1.50的要求。

赞贴

拍砖