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2020/9/30 8:59:39 4080楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
在所有色谱技术中，液相色谱法（liquid chromatography，LC）是最早（1903年）发明的，但其初期发展比较慢，在液相色谱普及之前，纸色谱法、气相色谱法和薄层色谱法是色谱分析法的主流。到了20世纪60年代后期，将已经发展得比较成熟的气相色谱的理论与技术应用到液相色谱上来，使液相色谱得到了迅速的发展。特别是填料制备技术、检测技术和高压输液泵性能的不断改进，使液相色谱分析实现了高效化和高速化。具有这些优良性能的液相色谱仪于1969年商品化。从此，这种分离效率高、分析速度快的液相色谱就被称为高效液相色谱法（high performance liquid chromatography，HPLC），也称高压液相色谱法或高速液相色谱法。经过30多年的发展，现代高效液相色谱技术得到了不断的完善和改进，在输液泵、检测器、色谱柱及数据控制和处理系统等方面采用了许多专利技术，使泵的稳定性和重复性、检测器的灵敏度和检出能力、色谱柱的分离效能和应用范围及数据处理软件的智能化得到了很大的提高。
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2020/9/30 8:59:53 4081楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
气相色谱只适合分析较易挥发、且化学性质稳定的有机化合物，而HPLC则适合于分析那些用气相色谱难以分析的物质，如挥发性差、极性强、具有生物活性、热稳定性差的物质。现在，HPLC的应用范围已经远远超过气相色谱，位居色谱法之首。
从原理来看，高效液相色谱同经典液相色谱比较，没有很大的区别，主要体现在高灵敏度检测，高压泵和高效固定相填料。在保持高效分离效率，高检测灵敏度和高分析速度前提下，也保持了经典液相色谱的特点：分析样品种类多，流动相多样化和便于制备色谱等特点。
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2020/9/30 9:00:09 4082楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
液相色谱特点主要是：高分离度（由于使用高效固定相，分析样品柱效可达到十几万）；高灵敏度（使用紫外检测器可以检测出10-9g，使用荧光检测器可以达到10-12g）；高分析速度（一般含量测定的只要几分钟到几十分钟），还有适用范围广，易制备等特点。
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2020/9/30 9:00:14 4083楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
1、高效液相仪的构成
高效液相色谱仪主要包括以下部件：溶剂瓶，溶剂瓶箱，在线脱气机，液相泵，（手动）自动进样器（六通阀），色谱柱，柱温箱，检测器。不同的配置可以有不同的模块（如自动进样器恒温器，二维色谱接不同类型检测器等）。
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2020/9/30 9:00:34 4084楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
3、液相泵
液相色谱的输液系统主要是用高压输液泵(制备色谱对压力的要求相对较低)，对泵的各项技术指标要求较高。一般最高输出压力应在401~600kg/cm2，流量范围0.1-l0ml/min。为使对液体流速敏感的检测器能稳定地工作，使色谱定性、定量分析具有良好的重现性，要求泵的输出流量恒定，无脉冲且具有高的流量精度和重复性。
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2020/9/30 9:00:51 4085楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
对液相泵的要求：压力平稳，无脉冲，泵体材料耐腐蚀，输出流量稳定，重复性高,输出流量范围宽，泵腔的体积要小，以便快速更换溶剂，能在高压下连续工作。
泵流量稳定可以降低对脉动敏感型检测器基线噪音的影响，改善灵敏度，降低检测限，使积分更准确，积分结果的可靠性和重现性更好。流量的重现性可改善保留时间和峰面积重视性，使定量结果重现从而获得更高质量的定量结果。
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2020/9/30 9:01:07 4086楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
3.1 泵的类型
目前主要液相泵的类型为：恒流泵，包括：注射型泵，往复泵（双泵头往复式柱塞泵和双柱塞往复式串联泵）。
注射泵优点是在高输液压力下给出精确的无脉动、可重现的流量；可能过改变电动机的电压，控制电动机的转速，来改变活塞的移动速度，从而可调节流动相流理，使其输出流理与系统阴力无关；流量稳定，操作方便。缺点是泵液缸容积有限，每次流动相输完后，需得新吸入流动相，不利于连续工作。密封性要求高，更换溶剂不方便，价格昂贵。
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2020/9/30 9:01:31 4087楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
隔膜式往复泵：与柱塞式往复泵相似,只是流动相接触的不是活塞,而是具有弹性的不锈钢或聚四氟乙烯隔膜，隔膜经液压驱动脉冲式地排出或吸入流动相，优点是避免流动相被污染。
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2020/9/30 9:01:46 4088楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
3.2泵模块的组成
泵模块主要有以下几个部件组成，泵头，主动输入阀，阻尼器，清洗阀，单向阀，混合器等。
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2020/9/30 9:01:58 4089楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
3.3 泵梯度淋洗装置
高效液相色谱仪主要有两种梯度模式，一种为高压梯度，一种为低压梯度模式。此时管路的连接方式也不尽相同。
外梯度：利用两台高压输液泵，将两种不同极性的溶剂按一定的比例送入梯度混合室，混合后进入色谱柱。
内梯度：一台高压泵, 通过比例调节阀,将两种或多种不同极性的溶剂按一定的比例抽入高压泵中混合。
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