主题:【已应助】[新人求助] 正相色谱没有置换会柱压不稳定吗?

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Insm_d6616d8d
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朋友第一次做正相色谱。

他没有做异丙醇的从反相置换到正相。而且流动相也没由进行脱气的操作,

然后朋友就表示检测时柱压很不稳定,由6Mpa-12Mpa波动,无法测定。

而且就第一次检测出了峰,第二次连样品峰都出不了。

这种情况,朋友就想问下不置换对柱压的影响大,还是不脱气的影响更大?

还是说我要建议他两个操作都需要进行?

不进行的话会损坏色谱柱和仪器吗?

编辑:

朋友做的是HILIC色谱(亲水相互作用色谱),是亲水的正相柱。

拿到柱子后用0.1ml/min的乙腈冲了一晚,

样品用甲醇:三氯甲烷(15:85),1ml/min跑的。

是因为没有置换,所以柱子坏了吗?
推荐答案:sdlzkw007回复于2021/12/28
很大概率是色谱柱损坏了,通常来说正相过渡到反相必须要经过异丙醇(100%),由于粘滞阻力很大,流速设的低一点儿。充分转换成反相才可以用反相色谱法检测。另外需要注意,有些色谱泵柱塞杆密封圈不耐受正相溶剂,需要更换成指定的部件方可进行正相色谱法检测。
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sdlzkw007
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很大概率是色谱柱损坏了,通常来说正相过渡到反相必须要经过异丙醇(100%),由于粘滞阻力很大,流速设的低一点儿。充分转换成反相才可以用反相色谱法检测。另外需要注意,有些色谱泵柱塞杆密封圈不耐受正相溶剂,需要更换成指定的部件方可进行正相色谱法检测。
valorb
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6Mpa-12Mpa的波动,这么大的压力波动不会是未脱气造成的,感觉是泵头进空气了。先拆下入口和出口单向阀,用异丙醇超声清洗,用异丙醇高流速排空5min,确保废液没有气泡吧。异丙醇冲洗整个系统,冲洗时先不接柱子。待压力稳定后,再接柱子,用异丙醇过渡。运气好的话还能救回柱子
robin_clhx
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要通过异丙醇缓慢置换流动相,异丙醇的粘度很大,只能用很低的流速冲,必须完全置换过来才可以,否则,正相柱很容易就废了
安平
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具体用了什么色谱柱?

有可能会造成色谱柱的损坏。
Insm_d6616d8d
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原文由 色谱攻城狮(Ins_22d1863b) 发表:
感觉柱完了,什么柱,氨基,亲水C18,比C18贵。


亲水相互作用色谱(HILIC),应该是亲水柱。

朋友说他拿到柱子后是直接纯乙腈0.2L/min冲洗了一晚,

然后就用甲醇:三氯甲烷=15:85的流动相去跑样品了,不知道是不是柱子坏了。





Methonal
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先置换过来再进行测试看柱子怎么样。实践才能得出适合自己的结论
Insm_d6616d8d
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原文由 安平(byron1111) 发表:
具体用了什么色谱柱?

有可能会造成色谱柱的损坏。

朋友做的是HILIC色谱(亲水相互作用色谱),是亲水的正相柱。

拿到柱子后用0.1ml/min的乙腈冲了一晚,

样品用甲醇:三氯甲烷(15:85),1ml/min跑的。

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