主题：【第十四届原创】人用肝素化采血管的质量控制

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冲锋队发表于：2021/09/27 08:31:01 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

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抽血过程中常用绿色系列头盖的真空采血管，其为含肝素添加剂的抗凝管，其中深绿色头盖为肝素钠抗凝管，浅绿色头盖添加了惰性分离胶管和肝素锂抗凝剂，为血浆分离管。肝素具有加强抗凝血酶III灭活丝氨酸蛋白酶的作用，从而阻止凝血酶的形成，延长标本凝血时间，并有阻止血小板聚集等多种抗凝作用。深绿头盖适用于红细胞脆性试验，血气分析，红细胞压积试验，血沉等生化检测。浅绿头盖可达到快速分离血浆的目的，是电解质检测的最佳选择，也可用于常规血浆生化测定和ICU等急诊血浆生化检测，其血浆标本可直接上机并在冷藏状态下保持48小时稳定。过量的肝素会引起白细胞的聚集，不能用于白细胞计数。因其可使血片染色后背景呈淡蓝色，也不适于白细胞分类。
对真空采血管中的肝素进行含量检测至关重要，这直接关系到血液的保存效果及后续的生化分析。利用亚甲蓝分光光度法测定采血管中肝素锂/肝素钠效价的方法对其进行质量控制，试验原理为肝素与亚甲蓝溶液发生褪色反应，且吸光度的降低与溶液中肝素浓度呈正比来测定肝素锂/肝素钠的含量。
首先绘制标准曲线，称取适量肝素锂/肝素钠标准品配成浓度约为1IU/mL的肝素锂/肝素钠标准溶液。取6个10mL容量瓶精密加入浓度约为1IU/mL的肝素锂/肝素钠标准溶液0mL、0.5mL、1.0mL、1.5mL、2.0mL、2.5mL,于上述各容量瓶中分别精密加入浓度为0.1g/L亚甲蓝溶液0.4mL(临用配制),加水稀释至刻度,摇匀,室温放置1h,得浓度约为0 IU/mL、0.05IU/mL、0.10IU/mL、0.15IU/mL、0.20IU/mL、0.25IU/mL肝素锂/肝素钠的溶液。以水为参比,在664nm下测定各溶液的吸光度。以浓度C(IU/mL)为横坐标，吸光度为纵坐标绘制标准曲线,并求出回归方程。
然后是样品的测定，抽取采血管3支，反复加入公称容量的水，涡旋混匀，收集至一适宜的容量瓶中 (体积为V)，加水稀释至刻度，摇匀，制成每1mL约含1IU~2IU的样品溶液。精密量取上述样品溶液10mL于10mL容量瓶中，精密加入浓度为0.1g/L亚甲蓝溶液0.4mL，加水稀释至刻度，摇匀，室温放置1h。以水为参比，在664nm下测定各溶液的吸光度，用回归方程求得各采血管中肝素溶液的浓度值。
按下式计算结果：W=10CV。式中：W为采血管中添加剂含量，单位为IU；C为标准曲线上查出的各采血管中肝素溶液的浓度，单位为IU/mL; V为容量瓶体积，单位为mL。根据公称容量的不同，有不同的含量规定，一般公称容量为5 mL的采血管规定添加剂含量为15-30 IU，才能满足临床需求。