主题:【华山论剑第十二集】使用液质联用仪时, 如何进行样品预处理?

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dickwang2008
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在应用液质联用仪进行试验时,首先要求样品必须干净,不能太脏,这样可以尽量避免堵塞柱子,减少离子抑制,减少质谱污染……
大家可以就自己在平时试验中遇到的相关问题、总结的经验拿出来分享一下,有价值的帖子将额外给与奖励。


与主题帖内容无关的删之。
推荐答案:lianhongwang回复于2008/02/29
1、样品必须过0.22um滤膜过滤,不得有颗粒物;
2、上样的溶剂,必须是色谱纯,最好和你的流动相比例一致;
3、反相体系,不允许用正己烷之类极性弱的溶剂溶解样品并上样。
4、水,自然是纯净水了;
5、样品不允许含有金属离子、表面活性剂、磷酸盐、硼酸盐等不挥发盐;
6、淋洗液缓冲溶剂必须用可挥发的,如乙酸、乙酸铵、氢氧化四丁基铵等,色谱纯级别。
7、样品pH5~7严禁含有无机或有机强酸强碱。
补充答案:

ElderYu回复于2007/12/10

保持干净,所以上机液需要过0.22um的膜
平衡柱子时,先用weak wash然后用stong wash
流动相的水必须是超纯水
waters的仪器的话,还不能沾洗洁精
...

青橄榄回复于2007/12/10


刚开始用,就买来了0.22um的膜,可即便是高纯水和HPLC级的溶剂,想过0.22um的膜也很难,于是放弃过滤的手续了,但也听人说,过滤膜反而增加了二次污染,所以,现在没有过滤,不知道有问题没有,现在是新仪器,一时半会看不出毛病,但总之是个心病,不知怎办好,尽量在用新鲜制备的高纯水,免不了还是要用上几天。
能解释下什么是weak wash和strong wash吗?平衡柱子时,我们是断开质谱接口的。
因为有了液质,常常听到这样的说法,前处理可以变简单,液相分离也不用太讲究。所以,想买SPE柱的计划都很难批,具体用的,感到前处理,还是很必要的,做过土壤中的一个项目,离子抑制效应很强,上GPC处理后,情形很不一样了,不但回收率做的好,农药降解的数据也很有规律。不做前处理时,有时虽然可以走一两针好的图谱,可进样次数增加后,压力很快上升了,样品溶液是过了0.45um膜的。我是这样理解的,质谱检测是特征离子,对于在相同数量级的干扰是可以避开的,但对于在数量上远远大于目标物的基质背景,干扰还是存在的,即便有液质,前处理还是必须的,包括液相分离。所以很想得到这个观点的支持。

lulang回复于2007/12/11

样品前处理要看具体情况拉,这个对GC/MS,LC/MS是一样的,至于柱子平衡,那肯定是必须的,一定要注意不要把柱子或管路的东西冲到MS里去.

Mix_Grey回复于2007/12/11

1. 适当应用六通阀切换,将溶剂峰和大的干扰杂质峰挡在质谱的门外,这是最大程度保护质谱的办法.
2. 及时清洗锥孔和挡板,这是避免四极杆受污染的有效措施.
3. 做好前处理,解决样品污染的终极武器.
4. 使用适合MS的不含不可汽化盐的流动相并用0.22um的过滤

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ElderYu
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保持干净,所以上机液需要过0.22um的膜
平衡柱子时,先用weak wash然后用stong wash
流动相的水必须是超纯水
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...
青橄榄
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原文由 yuzq46 发表:
保持干净,所以上机液需要过0.22um的膜
平衡柱子时,先用weak wash然后用stong wash
流动相的水必须是超纯水
waters的仪器的话,还不能沾洗洁精
...

刚开始用,就买来了0.22um的膜,可即便是高纯水和HPLC级的溶剂,想过0.22um的膜也很难,于是放弃过滤的手续了,但也听人说,过滤膜反而增加了二次污染,所以,现在没有过滤,不知道有问题没有,现在是新仪器,一时半会看不出毛病,但总之是个心病,不知怎办好,尽量在用新鲜制备的高纯水,免不了还是要用上几天。
能解释下什么是weak wash和strong wash吗?平衡柱子时,我们是断开质谱接口的。
因为有了液质,常常听到这样的说法,前处理可以变简单,液相分离也不用太讲究。所以,想买SPE柱的计划都很难批,具体用的,感到前处理,还是很必要的,做过土壤中的一个项目,离子抑制效应很强,上GPC处理后,情形很不一样了,不但回收率做的好,农药降解的数据也很有规律。不做前处理时,有时虽然可以走一两针好的图谱,可进样次数增加后,压力很快上升了,样品溶液是过了0.45um膜的。我是这样理解的,质谱检测是特征离子,对于在相同数量级的干扰是可以避开的,但对于在数量上远远大于目标物的基质背景,干扰还是存在的,即便有液质,前处理还是必须的,包括液相分离。所以很想得到这个观点的支持。
该帖子作者被版主 dickwang200810积分, 2经验,加分理由:提问有价值
dickwang2008
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2楼提到的平衡柱子,我理解成冲洗柱子不知道是否正确?我们在实验结束时一般先用Weak Wash后用Strong wash平衡。对于提到的样品处理,那肯定是必须的,如果不进行前处理,一是样品很脏,容易减少柱子的使用寿命;二是容易污染质谱;三是降低检测的灵敏度。而对于色谱条件,这个呢虽然不用像液相那样优化,但是为了增强离子化,还得进行复杂的溶剂系统考察,只是对分离度的要求要低一些!
dickwang2008
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原文由 yuzq46 发表:
保持干净,所以上机液需要过0.22um的膜
平衡柱子时,先用weak wash然后用stong wash
流动相的水必须是超纯水
waters的仪器的话,还不能沾洗洁精
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其实我对这个就感到不理解。为什么其他的仪器可以使用磷酸盐或者清洗玻璃仪器时可以使用洗洁精?而waters的不能呢?
lulang
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样品前处理要看具体情况拉,这个对GC/MS,LC/MS是一样的,至于柱子平衡,那肯定是必须的,一定要注意不要把柱子或管路的东西冲到MS里去.
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Last edit by dickwang2008
Mix_Grey
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1. 适当应用六通阀切换,将溶剂峰和大的干扰杂质峰挡在质谱的门外,这是最大程度保护质谱的办法.
2. 及时清洗锥孔和挡板,这是避免四极杆受污染的有效措施.
3. 做好前处理,解决样品污染的终极武器.
4. 使用适合MS的不含不可汽化盐的流动相并用0.22um的过滤
该帖子作者被版主 dickwang20085积分, 2经验,加分理由:内容简洁准确
watercenter_0
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对于生物样品的前处理,与液质联用时,
一般不采用沉淀蛋白法,其处理效果不如液液萃取、固相萃取,其处理出来的
样品比较“脏”,堵塞碰口。

bocai
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保持干净,所以上机液需要过0.22um的膜
平衡柱子时,先用weak wash然后用stong wash
流动相的水必须是超纯水
waters的仪器的话,还不能沾洗洁精
...


其实我对这个就感到不理解。为什么其他的仪器可以使用磷酸盐或者清洗玻璃仪器时可以使用洗洁精?而waters的不能呢?

其他的仪器可以么???
各家的一起在这方面的要求是一样的。
天翼
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仪器刚刚安装完毕,在调试方法,自我感觉过.22的滤膜可能并不好,会引入新的杂质离子,我们实际用进口的,听工程师讲水最好用娃哈哈的纯净水,不知道有没有推销之嫌,但是效果还是挺好的。
akun0225
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最近正在做液质联用的PPT,这一点也丰富了我的ppt谢谢分享!
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