主题：【转帖】薄层扫描法测定粉萆薜和绵萆薜中薯蓣皂苷元的含量

2 方法与结果 
2．1 对照品芤旱闹票福壕艹迫【?0℃干燥至恒重的薯蓣皂苷元约10mg，加甲醇溶解，并制备成每lml含薯蓣皂苷元0.5mg的溶液，作为对照品溶液。    2．2 试品溶液的制备：取供试品粉萆薜25g，绵萆薜10.0g，加21ml／L的盐酸50ml加热回流3小时使其水解冷却过滤，药渣用水洗至中性。置80℃干燥。干燥物置索氏提取器中，用石油醚(60～90℃)30ml水浴加热回流4h将石油醚挥干后，加甲醇于残渣中并定量转移到50.0ml容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀。作为供试品溶液。 
  2．3 色谱系统：以0.5％CMC-Na为粘合剂的硅胶G薄层板。展开剂为氯仿-丙酮(9.7：0.3)，展距10cm，展开后迅速吹干，喷以10％的硫酸乙醇溶液，105℃加热至斑点显色清晰，取出，立即在薄层板上覆盖上同样大小的玻板，周围以封口胶封好。 
2．4 扫描参数：将薯蓣皂苷元对照品溶液，绵萆薜，粉萆薜和空白溶液点于同一块薄层板上，依法展开显色后对斑点进行波长扫描，结果在480nm波长处均有最大吸收，空白无干扰，故确定检测波长为480nm，参比波长为?00nm。扫描方式：双波长，反射法，线性扫描，狭道0.4xl0.0nm，线性参数SX=3。 
2．5 标准曲线与线性范围：用定量毛细管吸取薯蓣皂苷元对照品溶液1、2、3、4、5μl，分别点于同一块板上，依法展开，显色，按上述条件进行试验，记录峰面积分值，以斑点的峰面积分值为纵坐标，点样量(μg)为横坐标，数据见表1，绘制标准曲线，其回归方程为Y=372.83X十63.339，r=0.999。结果表明，点样量在0.5—2.5μg之间有良好的线性关系。因截距不为零，故采用两点校正法。   
2．6 样品测定：精密吸取供试品溶液粉萆薜lμl，绵萆薜3μl，对照品溶液1.3μl，分别交叉点于同一块薄层板上，依法展开，显色，扫描得出供试品吸收度积分值与对照品吸收度积分值，以外标两点法计算供试品中薯蓣皂苷元的含量。 
2．7 精密度试验：精密吸取对照品溶液2μl共6份，分别点于同一薄层板上，依法展开，显色，扫描。测得同板6点同浓度吸收度积分值，RSD=1.21％(n=6)，另取6块硅胶CMC—Na薄层板，分别点对照品溶液2μl，依法测得异板同浓度吸收度积分值，RSD=2.03％(n=6)。 
2．8 稳定性试验：取同批号的供试品溶液，依法点样，展开，显色，封好在0.5、1、2、4、8、12小时内进行扫描，记录色斑吸收度积分值，在12小时内基本稳定，RSD=1.27％(n=6)。 
2．9 加样回收试验：称取已知含量的绵萆薜和粉萆薜各3份，分别精密加入薯蓣皂苷元，按供试品溶液制备方法制备，再按样品测定方法进行点样，展开，显色，扫描，并计算回收率。

3 讨论 
3．1 展开剂的选择：实验证明，展开剂以氯仿-丙酮(9.7：0.3)最为适宜，因氯仿极性比丙酮小，而丙酮在整个展开剂中起到调节比移值的作用，故丙酮比例过大或过小都会影响各斑点的分离，使斑点不清晰或有拖尾的现象。 
3．2 近年来，对粉萆薜和绵萆薜中薯蓣皂苷元含量测定研究的报告较少，有利用反相高效液相色谱法四，而本方法方便、简单、准确，可用于该品种的质量控制。
参考文献
[1]中华人民共和国药典委员，中国药典，一部，北京：化学工业出版社，2000：237，271来源：东方医药网

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