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主题：【求助】测GST酶碰到的问题

浏览0 回复8 电梯直达
kechenghuang
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发表于：2008/06/17 01:29:55 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我在测GST酶时，我碰到了一个非常郁闷的问题，那就是我测的酶活力值居然是负值，对照调零那总是不能很好的调到零，不知道是哪里出问题了，现在我将我的其中的步骤写下来给大家看看，是哪里出了问题：

PH6,5  0.04M 缓冲液，2.7ML（没有加入EDTA）
酶液      0.1ML
20mMGSH    0.1ML
加入到试管中，30度温浴3分钟
再加入20mMCDNB      0.1ML

记录1分钟340nm处的光吸收值的变化。


其中除了 温浴是在常温下，其它的都是在冰水中。
请各位帮我看下是哪里出了问题？如果有哪位跟我一样，请电邮我：kechenghuang@gmail.com
谢谢！
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2008/6/17 20:16:31 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
请问您每个都做样品空白吗，测定样品时有没有悬浮物，过一段时间可能会沉淀影响吸光值
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初学者&九点虎
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2008/6/17 20:57:43 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我不知道您这种情况是偶然,你再做过吗?能不能重现呢?
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kechenghuang
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2008/6/18 1:09:06 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
其中的底物是用丙酮来溶解的，比较容易挥发。同时，我在测的时候并没有每个都用样品对照，所以，这也是我的实验失败的原因吧！

我想我应该在做的时候每个都要用样品对照，这才可能使我的实验更加准确！
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初学者&九点虎
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2008/6/23 22:03:48 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 kechenghuang 发表:
其中的底物是用丙酮来溶解的，比较容易挥发。同时，我在测的时候并没有每个都用样品对照，所以，这也是我的实验失败的原因吧！

我想我应该在做的时候每个都要用样品对照，这才可能使我的实验更加准确！

用丙酮来溶解的，比较容易挥发,挥发也没那么快
带个标准物质做做,看看什么情况,比较容易找到原因
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kechenghuang
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2008/6/25 2:46:59 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
请问什么是标准物质？还有我想问下，如果我想同时用空白对照和样品对照来调零，我应该怎么做？难道先用空白调再用样品来调吗？
谢谢 ！
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2008/6/25 21:35:14 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 kechenghuang 发表:
请问什么是标准物质？还有我想问下，如果我想同时用空白对照和样品对照来调零，我应该怎么做？难道先用空白调再用样品来调吗？
谢谢 ！

我所说的样品空白是指不加样品（可用蒸馏水代替），其他药品跟样品一样依次加入，这样做是为了消除所添加试剂对吸光度的影响
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kechenghuang
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2008/6/26 12:36:48 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我想知道我应该怎样来利用样品对照和空白对照来调零？谢谢！
我只是做了样品对照，并且是每个样品就设了个对照，这样才能保证不出现负值。
原文由 pchduan 发表:
原文由 kechenghuang 发表:
请问什么是标准物质？还有我想问下，如果我想同时用空白对照和样品对照来调零，我应该怎么做？难道先用空白调再用样品来调吗？
谢谢 ！

我所说的样品空白是指不加样品（可用蒸馏水代替），其他药品跟样品一样依次加入，这样做是为了消除所添加试剂对吸光度的影响
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pchduan
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2008/6/28 22:43:50 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 kechenghuang 发表:
我想知道我应该怎样来利用样品对照和空白对照来调零？谢谢！
我只是做了样品对照，并且是每个样品就设了个对照，这样才能保证不出现负值。

既然这样，你可以先用空白调，然后用样品对照调试试看
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