快速导航采购仪器提醒

液相色谱（LC）

版主:

入住本版

专家:

仪器信息网

居民列表

仪器社区 > 色谱 > 液相色谱（LC）帖子详情

快速回复发表新帖最新帖

返回列表

主题：【求助】荧光检测器的液相，急

浏览0 回复5 电梯直达

ada825

结帖率：

100%

关注：0 |粉丝：0

新手级：新兵

发表于：2008/10/27 10:29:15 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

各位大侠：
　　我做荧光素钠的检测，流动相条件为０．０５ＭＯＬ／Ｌ的磷酸二氢钾（ＰＨ７．４）：甲醇＝５５：４５，激发波长４９０，发射波长５１５．我配了一个０．５微克／ＭＬ的标准品，进针１０微升后纵轴ＥＵ达１００００多，峰形还不错，我接着进样品，但同一样品的同一针都差别很大，差几十倍，最后我把进样量变为１微升我进了１５个样，有两个样两针是几乎一致的，其他的都有差别，有的甚至在我要的峰后还出来一个峰（有两个样是这个情况），我实在很不理解，不知道是哪里出了问题，下一步应该怎么办，怎么分析．大家做过的帮帮我，指点一下，急．
附件里是我的谱图，（样品数从１－８应该是浓度增大的，（因为是不同时间点的累积量，）肉眼明显看出样品７，８颜色深，但检测出来的峰却很小，）大家帮分析一下．

荧光素钠谱图

0
赞贴
5
回帖
0
收藏
0
拍砖
版主
招募

为您推荐

近期热榜

热门活动

您可能想找: 液相色谱(LC) 询底价

选参数看心得找厂商查方案

专属顾问快速对接

立即提交

可能感兴趣

Easy-Boy

禁止发帖修改昵称

ID：easyboy

行业：其他

积分：0升级还需100积分

声望：0升级还需100声望

注册时间：0000-00-00

最后登录时间：0000-00-00

进入iLog 私信关注

结帖率：

100%

关注：0 |粉丝：0

新手级：新兵

2008/10/27 13:02:57 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

进样量需要保持5ul以上才准确，如果浓度大，可以稀释一下。

赞贴

拍砖

duming

禁止发帖修改昵称

ID：duming

行业：其他

积分：0升级还需100积分

声望：0升级还需100声望

注册时间：0000-00-00

最后登录时间：0000-00-00

进入iLog 私信关注

结帖率：

100%

关注：0 |粉丝：0

新手级：新兵

2008/10/27 19:04:12 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

考虑一下是不是增益设置太大了,重显性不好是不是样品不稳定

赞贴

拍砖

阿图

禁止发帖修改昵称

ID：tfchen

行业：其他

积分：0升级还需100积分

声望：0升级还需100声望

注册时间：0000-00-00

最后登录时间：0000-00-00

进入iLog 私信关注

结帖率：

100%

关注：0 |粉丝：0

新手级：新兵

2008/10/28 0:42:30 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

样品有没有充分混匀活着样品本身稳定性太差呢？

赞贴

拍砖

qingqingcao

禁止发帖修改昵称

ID：qingqingcao

行业：其他

积分：0升级还需100积分

声望：0升级还需100声望

注册时间：0000-00-00

最后登录时间：0000-00-00

进入iLog 私信关注

结帖率：

100%

关注：0 |粉丝：0

新手级：新兵

2008/10/30 23:28:40 地毯管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 ada825 发表:
各位大侠：
　　我做荧光素钠的检测，流动相条件为０．０５ＭＯＬ／Ｌ的磷酸二氢钾（ＰＨ７．４）：甲醇＝５５：４５，激发波长４９０，发射波长５１５．我配了一个０．５微克／ＭＬ的标准品，进针１０微升后纵轴ＥＵ达１００００多，峰形还不错，我接着进样品，但同一样品的同一针都差别很大，差几十倍，最后我把进样量变为１微升我进了１５个样，有两个样两针是几乎一致的，其他的都有差别，有的甚至在我要的峰后还出来一个峰（有两个样是这个情况），我实在很不理解，不知道是哪里出了问题，下一步应该怎么办，怎么分析．大家做过的帮帮我，指点一下，急．
附件里是我的谱图，（样品数从１－８应该是浓度增大的，（因为是不同时间点的累积量，）肉眼明显看出样品７，８颜色深，但检测出来的峰却很小，）大家帮分析一下．
荧光素钠谱图
 荧光素钠谱图

我大概明白了。
原因是你测试时间太短了。因为样品中可能还有其他杂质，你每个样品不要用15分钟。用30钟。看看后面还有其他杂质峰。
很明显请看5-1ul那个样品。其中前面有几个峰。这几个峰可能前样品强保留的。措施有两种：
1.延长测试时间。30分钟。
2.注意清洗进样针。

赞贴

拍砖

ada825

禁止发帖修改昵称

ID：ada825

行业：其他

积分：0升级还需100积分

声望：0升级还需100声望

注册时间：0000-00-00

最后登录时间：0000-00-00

进入iLog 私信关注

结帖率：

100%

关注：0 |粉丝：0

新手级：新兵

2008/11/3 8:28:31 地板管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 duming 发表:
考虑一下是不是增益设置太大了,重显性不好是不是样品不稳定

确实是增益设太大了，原来是1，这次调为1000，就好一些，而且进样针的位置调的不对，可能是太高了，吸不满。后来又把针的位置调了一下，每两针的重复性都还不错，但是我是二组样品，理论上应该差不太多，实际结果差的挺多，我每个样进两针，重复性挺好，是不是就是我样品的问题了，机器系统是不是没什么问题了？大家帮忙看一下附件里的谱图（L的是一组，R的是一组，后面标志的数字如60是时间，我在60，90直至240分钟，每30分取样一次，样品里的荧光素钠浓度应该是越来越高的。）进行了两组，每一组的趋势倒还行，但两组差异有些大，每个时间应该是对应的。大家分析下如果机器和条件没问题，就应该是我取样的问题了，那我就再在取样上注意一下，调整一下。
还有一个问题，就是GBR那组，是把空白的GBR液体，也在5分的时候（跟荧光素钠的保留时间很接近）也出了一个小峰，是GBR本身出的峰，还是我稍微污染了GBR液呢（带入了些荧光素钠？）这个峰挺小的，峰高10左右，我样品中最小峰90左右，是不是可以忽略它，因为我感觉样品的趋势还不错，重复性也挺好。
谢谢各位了。

谱图

附件：

谱图

赞贴

拍砖

Last edit by ada825