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薄层色谱（TLC）
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主题：【求助】薄层色谱所进的样应该满足什么条件？

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dapang28
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发表于：2009/04/24 11:28:36 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
悬赏金额：20积分 状态： 未解决
我所做的是细菌胞外物质的提纯分离，这种物质具有较强的极性，将样品浓缩100倍后，进行薄层色谱分析，用甲醇：水=4：6展开，加硫酸110℃烘干半小时显色。显色后，板上的点极其分散（板上到处都是点，而且毫无规律，根本不在一条线上），请问这是什么原因？有没可能是样品物质太少？或者含水量太高？还是我操作有问题？

望各路大虾解答~
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hyban
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2009/7/15 18:29:06 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
用硫酸乙醇显色，你加热半个小时时间也太长了吧，板早烧黑了，要是板是加了CMC的就更黑了
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hyban
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2009/7/15 18:31:46 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
建议楼主修改一下展开剂，极性未免也太大了吧，
加热时间不要太长，第一次做的时候最好在旁边守着，随时观察，以掌握最佳显色时间。
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小卢
luxw
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2009/9/14 23:29:33 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 dapang28 发表:
我所做的是细菌胞外物质的提纯分离，这种物质具有较强的极性，将样品浓缩100倍后，进行薄层色谱分析，用甲醇：水=4：6展开，加硫酸110℃烘干半小时显色。显色后，板上的点极其分散（板上到处都是点，而且毫无规律，根本不在一条线上），请问这是什么原因？有没可能是样品物质太少？或者含水量太高？还是我操作有问题？

望各路大虾解答~



楼上也有提到关于加热时间的问题，其实薄层色谱做的时间久了，你会发现它给的条件都是错的，只是个大体的范围。比如时间，你要根据实际情况来判断是否可以了。告诉是半小时，也许几分钟就可以了。
还有你的点无规律，也许是你点样的问题，扩散的太厉害。原因有两个，一个是展开槽未饱和，一个是你点样的技术有点问题。
仅供参考！
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