原文由 dickwang2008(dickwang2008) 发表:原文由 bongyi 发表:
一直想请教楼主个问题,像分析那些蛋白结合率较高的物质,如果采用沉蛋白的方法处理样本,会不会有一定比例的待测物质随蛋白一起被沉淀,一般情况下比例会有多少,同一物质这个比例会比较稳定吗?
个人认为待测物质不会随蛋白一起被沉淀,这是由蛋白沉淀的原理决定的。因为沉淀蛋白是利用沉淀试剂如甲醇、乙腈或者高氯酸等将蛋白变性,形成沉淀,而化合物会溶解到沉淀试剂中。这种方法可能会将一些内源性物质带入到沉淀试剂中,产生基质效应。
原文由 MandyCheng(gtyt1324) 发表:
这几天正在研究串联质谱方法分析生物样品的方法验证步骤。现在有两个概念我有些confused,一个是ion suppression,一个是interference。在Cleveland Clinic,其方法验证的步骤包括了ion suppression,分exogenous 和endogenous,有不同的评价方法;还包括interference,也分为这两种。请问LZ,exogenous主要指的什么?您认为应该用什么样的方法评价这两种不同类型的ion suppression呢?谢谢!
原文由 MandyCheng(gtyt1324) 发表:原文由 dickwang2008(dickwang2008) 发表:原文由 bongyi 发表:
一直想请教楼主个问题,像分析那些蛋白结合率较高的物质,如果采用沉蛋白的方法处理样本,会不会有一定比例的待测物质随蛋白一起被沉淀,一般情况下比例会有多少,同一物质这个比例会比较稳定吗?
个人认为待测物质不会随蛋白一起被沉淀,这是由蛋白沉淀的原理决定的。因为沉淀蛋白是利用沉淀试剂如甲醇、乙腈或者高氯酸等将蛋白变性,形成沉淀,而化合物会溶解到沉淀试剂中。这种方法可能会将一些内源性物质带入到沉淀试剂中,产生基质效应。
怎样才能判断蛋白沉淀的完全不完全呢?