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主题：【求助】急，求助：蛋白为RNases，表达在包涵体中，相关问题？？

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发表于：2009/11/23 19:28:12 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊

我的蛋白为RNases，表达在包涵体中，理论上有4对二硫键，8个游离巯基。我把包涵体溶在8M脲中，然后加入5mMDTT，还原过夜。然后用 AEMTS终浓度100mM烷化1h做MALDI-TOF。结果显示烷化上了6个游离巯基。请问是烷化条件不够还是DTT没有将包涵体的二硫键全部还原？还是蛋白本身构象问题使一个二硫键埋在内部，DTT作用不到？急，求救！
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2009/11/24 10:36:07 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
怎么没回答我啊？？
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