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主题：【求助】HPLC检测杨梅酮、槲皮素、芹菜素用30%甲醇/水溶解为什么不出峰

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kkdou
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发表于：2010/01/07 17:19:15 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
各位大侠，我最近用液相做黄酮的标品，摸索液相条件。用的C18的柱子，流动相为乙腈、水，以我师姐的经验，溶剂用甲醇/水峰型比较漂亮，但是不是说用流动相溶解比较好么，所以我就做了一个对比，但发现在相同的浓度下，在30％甲醇/水中，杨梅酮、槲皮素、芹菜素不出峰，在30％乙腈/水中出峰，但是峰型不好看。为什么在30％甲醇/水中不出峰呢？
谢谢各位赐教了，我是个新手，望多多帮助！
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2010/1/7 18:51:40 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
在30％甲醇/水中，杨梅酮、槲皮素、芹菜素能溶解吗？了解一下这几个物质的性质，调整一下流动相ＰＨ看看，你走了多长时间不出峰，你确定在你的采集时间内看到的峰是所要的成分峰吗？
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〓猪哥哥〓
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2010/1/7 19:00:41 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
乙腈洗脱能力比甲醇强，保留时间小，需要再延长分析时间或增大甲醇的比例看看
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tyys98
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2010/1/8 0:13:21 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
不能教条，槲皮素、芹菜素等等这些黄酮极性比较弱，要用100%甲醇等溶剂配制贮备液（0.1%左右），然后可以用流动相稀释到50微克/毫升以下的浓度，作为工作液。否则直接配制有可能溶解不充分。
第2，你的条件（30%甲醇）是洗脱不出来的，需要更高的浓度才行，而30%乙腈洗脱强度较甲醇高。
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知足常乐！
wenshaowei-2008
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2010/1/8 15:34:38 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
也有可能就是在甲醇/水的体系中，被测物质吸收弱或无吸收
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tyys98
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2010/1/9 11:55:39 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 知足常乐！(wenshaowei-2008) 发表:
也有可能就是在甲醇/水的体系中，被测物质吸收弱或无吸收

不可能！甲醇是黄酮的良好溶剂体系，而且黄酮化合物的标准UV吸收光谱都是在甲醇中测定的。
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