主题:【讨论】用什么方法抑制色谱柱内的细菌生长?

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快乐
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大家是用什么方法抑制色谱柱内的细菌生长?
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huaibeijiayuan
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适当加入有机相就可以抑制细菌的生长
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plexu
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一般色谱柱内溶剂中有机相浓度超过20%就不会长菌,长期保存色谱柱则需要75%左右的有机相。

比色谱柱本身内部滋生细菌更厉害的是流动相内的细菌滋生。流动相内的细菌会不断被过滤留在色谱柱筛板上和色谱柱内。不含有机相的缓冲盐最容易长菌,一次不要配制太多,否则放久了里面必然长菌。夏天配好的缓冲盐最好放到冰箱中,温度低了长菌速度会慢。色谱柱柱压升高的一大罪魁祸首就是细菌堵塞色谱柱筛板或填料空隙,流动相中的细菌有的比筛板孔径2um大。
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土老冒豆豆
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那我可不可以这样理解,含缓冲盐的流动相,用前用0.45um滤膜滤过后,就可以放心使用了,只要用完后注意冲洗干净管路就可以了。
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Last edit by 土老冒豆豆
plexu
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原文由 土老冒豆豆(土老冒豆豆) 发表:
那我可不可以这样理解,含缓冲盐的流动相,用前用0.45um滤膜滤过后,就可以放心使用了,只要用完后注意冲洗干净管路就可以了。


绝大多数细菌的直径大小在0.5~5μm之间,0.45um滤膜过滤流动相是有效的。但实际操作中,往往有人会省略0.45um滤膜过滤这个步骤。
快乐
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一般色谱柱内溶剂中有机相浓度超过20%就不会长菌,长期保存色谱柱则需要75%左右的有机相。

比色谱柱本身内部滋生细菌更厉害的是流动相内的细菌滋生。流动相内的细菌会不断被过滤留在色谱柱筛板上和色谱柱内。不含有机相的缓冲盐最容易长菌,一次不要配制太多,否则放久了里面必然长菌。夏天配好的缓冲盐最好放到冰箱中,温度低了长菌速度会慢。色谱柱柱压升高的一大罪魁祸首就是细菌堵塞色谱柱筛板或填料空隙,流动相中的细菌有的比筛板孔径2um大。


100% 的有机相,对色谱柱不好吗?
快乐
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小卢
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也曾听过说有机相超过10%就能抑菌了,是否正确。


有道理,能抑菌啦,但效果不一定好,最好超过80%
sxzhao
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我记得除菌过滤用0.2μ的
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plexu
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一般色谱柱内溶剂中有机相浓度超过20%就不会长菌,长期保存色谱柱则需要75%左右的有机相。

比色谱柱本身内部滋生细菌更厉害的是流动相内的细菌滋生。流动相内的细菌会不断被过滤留在色谱柱筛板上和色谱柱内。不含有机相的缓冲盐最容易长菌,一次不要配制太多,否则放久了里面必然长菌。夏天配好的缓冲盐最好放到冰箱中,温度低了长菌速度会慢。色谱柱柱压升高的一大罪魁祸首就是细菌堵塞色谱柱筛板或填料空隙,流动相中的细菌有的比筛板孔径2um大。


100% 的有机相,对色谱柱不好吗?


长期保存色谱柱方法以前在本专版有帖子讨论过,100%有机相当然更不容易长菌,但容易挥发使色谱柱柱床变干而影响性能,所以用70-90%有机相保存更适宜。
可爱宝贝
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浸泡在有机溶剂中或80%的有机溶剂中,通常是甲醇或乙腈
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