主题：【讨论】怎么解决色谱柱灵敏度差的问题

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提高柱温能不能提高灵敏度？

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提高柱温能不能提高灵敏度？

没有听过这样的说法，提高柱温能加快样品出峰，缩短保留时间，但是太高的柱温，对色谱柱也是一种损害

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除非色谱柱柱效下降，否则灵敏顿很色谱柱无关。
为提高灵敏度，可在选柱上作如下改进：
1.选择细粒径的短柱，也就是由HPLC跳跃到UPLC；此时不论用何种检测器，灵敏度均提高；
2.填料和柱长不变，选择细内径的色谱柱，此时只有检测器为浓度型检测器时才有效，比如紫外-可见、荧光检测器等，对于质量型检测器基本无效（当然体积流速降低，质谱检测器的离子化效率升高，响应值也会略有增大，但涉及因素太多，不再深入讨论）；选用细内径的柱子时，应恒定流动相线速度，这样出峰时间、区域宽度柱性能均不改变，但流动相对组分的稀释情况下降，所以峰高会升高；举个例子，如果你从4.0 mm内径变为2.0内径，体积流速应变为原流速的1/4,响应值提高为原来的4倍，其余均不改变。另使用细径柱时，常常需要改进系统，减少柱外效应，否则可能会引起柱外展宽，使分离度下降。
其中2是对Plexu的补充。

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原文由 godblesschina(godblesschina) 发表:
除非色谱柱柱效下降，否则灵敏顿很色谱柱无关。
为提高灵敏度，可在选柱上作如下改进：
1.选择细粒径的短柱，也就是由HPLC跳跃到UPLC；此时不论用何种检测器，灵敏度均提高；
2.填料和柱长不变，选择细内径的色谱柱，此时只有检测器为浓度型检测器时才有效，比如紫外-可见、荧光检测器等，对于质量型检测器基本无效（当然体积流速降低，质谱检测器的离子化效率升高，响应值也会略有增大，但涉及因素太多，不再深入讨论）；选用细内径的柱子时，应恒定流动相线速度，这样出峰时间、区域宽度柱性能均不改变，但流动相对组分的稀释情况下降，所以峰高会升高；举个例子，如果你从4.0 mm内径变为2.0内径，体积流速应变为原流速的1/4,响应值提高为原来的4倍，其余均不改变。另使用细径柱时，常常需要改进系统，减少柱外效应，否则可能会引起柱外展宽，使分离度下降。
其中2是对Plexu的补充。

由HPLC跳跃到UPLC，而进样量也减少了。光从进样量来说，灵敏度也下降了，对吗？

原文由 godblesschina(godblesschina) 发表:
除非色谱柱柱效下降，否则灵敏度跟色谱柱无关。
为提高灵敏度，可在选柱上作如下改进：
1.选择细粒径的短柱，也就是由HPLC跳跃到UPLC；此时不论用何种检测器，灵敏度均提高；
2.填料和柱长不变，选择细内径的色谱柱，此时只有检测器为浓度型检测器时才有效，比如紫外-可见、荧光检测器等，对于质量型检测器基本无效（当然体积流速降低，质谱检测器的离子化效率升高，响应值也会略有增大，但涉及因素太多，不再深入讨论）；选用细内径的柱子时，应恒定流动相线速度，这样出峰时间、区域宽度柱性能均不改变，但流动相对组分的稀释情况下降，所以峰高会升高；举个例子，如果你从4.0 mm内径变为2.0mm内径，体积流速应变为原流速的1/4,响应值提高为原来的4倍，其余均不改变。另使用细径柱时，常常需要改进系统，减少柱外效应，否则可能会引起柱外展宽，使分离度下降。
其中2是对Plexu的补充。