书摘第一章
液相色谱基础
1.1
液相色谱基本原理和方法
现代科技和产业的发展,促进了以色谱仪器为代表的复杂样品的分离分析和分离纯化仪器的迅猛发展和推广应用,各种更新、更适用的色谱技术和色谱仪器不断涌现。当今发展最快的科技领域,如生命科学、生物工程、环境科学和生态保护、现代医学和中医药物、纳米科技等领域的基础研究和应用工作,都离不开各种类型的色谱仪器。目前,色谱法已经成为人们认识客观世界必不可少的工具,并在不断丰富、提高和发展的实践过程中形成了一门独立的学科。而由于
液相色谱具有的高分离效率、多功能等特征使其在所有色谱分离模式中,无论从研究开发,还是在应用范围、销售市场中都占据了领先的地位。
1.1.1 高效
液相色谱发展简史
早在古代罗马时期,人们已知道将一滴含有混合色素的溶液滴在一块布或一片纸上,通过观察溶液展开产生的同心圆环来分析染料与色素。实际上,这种简单操作已经采用了现代色谱学的基本原理。19世纪中叶,德国化学家Runge对古罗马人的这种方法作了重要的改进,使其具有更好的重现性与定量能力,使盐溶液可在纸上分离;另外,化学家Goppalsr—oeder也在长条纸上分离了染料和动植物色素,这些研究标志着纸色谱法的建立,并逐步发展成为现代色谱技术。
俄国植物学家Tswett在1903年的华沙自然科学学会生物学会会议上发表了题为“一种新型吸附现象及其在生化分析上的应用”的论文中提出了应用吸附原理分离植物色素的新方法,这一工作标志着现代色谱学的开始。他将碳酸钙装入竖直的玻璃柱中,从顶端倒入植物色素的石油醚浸取液,进一步采用溶剂冲洗,使溶质在柱的不同部位形成色带,第一次向人们公开展示了采用色谱法提纯的植物色素溶液以及色谱图——显示着彩色环带的柱管。Tswett将这种方法命名为色谱,管内填充物被称之为固定相,冲洗剂被称之为流动相。
20多年后,Kuhn等为了证实蛋黄内的叶黄素系植物叶黄素与玉米黄质的混合物,参考Tswett的方法,以粉碎的碳酸钙装填色谱柱,成功地从蛋黄中分离出植物叶黄素。他们工作的重要意义不仅仪在于证明了蛋黄叶黄素是氧化类胡萝b素的混合物,更重要的是证实色谱法可以用于制备分离。
……