主题:【求助】GPC--MALLS 测淀粉为什么总出现倒峰?流动相是DMSO

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fengfengwo1234
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GPC--MALLS联用,测玉米淀粉分子量,流动相是DMSO,在出了样品峰以后总会出现一个很大的倒峰,把原来的样品峰都给遮盖了,原因是什么啊?怎么消除倒峰?
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tigertooth
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这是溶剂峰,在做GPC的时候是很正常的。原因主要是进样时的溶剂与流动相相差太大:
1,虽然你也是用DMSO溶的样品,但经过柱子的与溶样的实际上还是有很大差别的。DMSO很爱吸水,所以你的流动相本身就在变化。也就是说你样品瓶里的DMSO和流动相瓶里的DMSO本身就不一样,就不要说经过柱子之后的了。
2,你的样品里有很多小分子的部分。
3,流动相本身就有气泡,这是避免不了的进样时带进去的一些小分子,小气泡什么的。
要消除的话,你可以试试:
1,系统配一个脱气机
2,用平衡系统时流出的流动相溶解样品,一般是收集平衡1小时以后的流动相。但前提是你的样品很好溶解,30-60分钟就能溶解,因为时间长了,DMSO吸水多了,就有变化大了。
3,再加一根柱子,出完峰,回到基线,在出溶剂峰前停止采集。
fengfengwo1234
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原文由 tigertooth(tigertooth) 发表:
这是溶剂峰,在做GPC的时候是很正常的。原因主要是进样时的溶剂与流动相相差太大:
1,虽然你也是用DMSO溶的样品,但经过柱子的与溶样的实际上还是有很大差别的。DMSO很爱吸水,所以你的流动相本身就在变化。也就是说你样品瓶里的DMSO和流动相瓶里的DMSO本身就不一样,就不要说经过柱子之后的了。
2,你的样品里有很多小分子的部分。
3,流动相本身就有气泡,这是避免不了的进样时带进去的一些小分子,小气泡什么的。
要消除的话,你可以试试:
1,系统配一个脱气机
2,用平衡系统时流出的流动相溶解样品,一般是收集平衡1小时以后的流动相。但前提是你的样品很好溶解,30-60分钟就能溶解,因为时间长了,DMSO吸水多了,就有变化大了。
3,再加一根柱子,出完峰,回到基线,在出溶剂峰前停止采集。


非常感谢!我的流动相都过滤、脱气了,样品也过滤,而且样品溶解的很好。你说的对,很有可能是溶解样品的DMSO吸水了,因为我溶解好的样品放置了一天,但是盖着盖子的。
  不过你说的在出溶剂峰之前就停止收集信号也是个办法!
daijuan
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楼上是哪的?在哪做的。我正在找这个仪器,也是测定淀粉分子量的,我是陕西的,请赐教!谢谢
小不董
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原文由 fengfengwo1234(fengfengwo1234) 发表:
GPC--MALLS联用,测玉米淀粉分子量,流动相是DMSO,在出了样品峰以后总会出现一个很大的倒峰,把原来的样品峰都给遮盖了,原因是什么啊?怎么消除倒峰?

你的样品和流动相的不一样,所以有倒峰,DMSO和水容易比例都可以互溶,所以淀粉样品一定要干燥,样品用流动相来溶解,溶解瓶要密封,干燥,保证溶剂和流动相尽量一致,这样才能减少溶剂峰。
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