原文由 zl2008boy(zl2008boy) 发表:
鼠血浆基质非常复杂,进行药代动力学研究时需要进行样品前处理,除血浆蛋白和残留血红素等。通常通过加入高比例甲醇或乙腈导致蛋白变性,进行高速离心使蛋白沉降,但其中还是会存在少量蛋白,另外血浆中水溶油溶基质会造成谱峰干扰。SPE相比传统液液萃取前处理增大了的净化选择性,另外,其浓缩能力也可以使得通过增大样品量进行高倍浓缩,显著降低检测险而不引起谱峰干扰。对于药代分析中药物消除点的极低浓度血药检测(几十钠克),过去需要LC-MS的也可以仅仅应用LC而不用动用质谱解决。但一个好的SPE前处理方法开发难度并不逊于HPLC方法开发,其实SPE和HPLC本身就是相同的过程,其实如果将SPE柱子变成分析柱,就近似为2维色谱分析。建议先做体外的,找好合适的柱子,C18,C8等等,在做体内的。如果是反相的,将药物组分强保留在柱头,水性基质流出,再洗脱药物,这个就是浓缩的一个极端,强保留的同时也强保留了非极性物质,分析时还是可能存在谱峰干扰。适当的极性洗脱,虽然可以分离一些极性相近的杂质,但也存在组分穿透的问题,这是净化的一个极端。要做的就是找到浓缩和净化的平衡点。以上是我做血浆SPE的一点愚见,抛砖引玉,各位前辈多多指教。
原文由 samanthalas(samanthalas) 发表:原文由 幽灵龙猫(xiaodu2007693) 发表:原文由 samanthalas(samanthalas) 发表:
我们公司的SPE小柱可以试用的,一般会根据客户的需要发3-5支左右。由于月旭公司的固相萃取产品最近才开始完善起来,所以在市场上还没有正式的推广。但是现在公司已经成立了专门的SPE专家小组,一切准备工作就绪,欢迎大家试用和反馈宝贵的意见!
太好了,如果老板最后决定让我做这个项目了,我考虑一下
如果老板最后决定让你做这个项目了,你还有什么好考虑的??!!
原文由 ruby70303(ruby70303) 发表:原文由 zl2008boy(zl2008boy) 发表:
鼠血浆基质非常复杂,进行药代动力学研究时需要进行样品前处理,除血浆蛋白和残留血红素等。通常通过加入高比例甲醇或乙腈导致蛋白变性,进行高速离心使蛋白沉降,但其中还是会存在少量蛋白,另外血浆中水溶油溶基质会造成谱峰干扰。SPE相比传统液液萃取前处理增大了的净化选择性,另外,其浓缩能力也可以使得通过增大样品量进行高倍浓缩,显著降低检测险而不引起谱峰干扰。对于药代分析中药物消除点的极低浓度血药检测(几十钠克),过去需要LC-MS的也可以仅仅应用LC而不用动用质谱解决。但一个好的SPE前处理方法开发难度并不逊于HPLC方法开发,其实SPE和HPLC本身就是相同的过程,其实如果将SPE柱子变成分析柱,就近似为2维色谱分析。建议先做体外的,找好合适的柱子,C18,C8等等,在做体内的。如果是反相的,将药物组分强保留在柱头,水性基质流出,再洗脱药物,这个就是浓缩的一个极端,强保留的同时也强保留了非极性物质,分析时还是可能存在谱峰干扰。适当的极性洗脱,虽然可以分离一些极性相近的杂质,但也存在组分穿透的问题,这是净化的一个极端。要做的就是找到浓缩和净化的平衡点。以上是我做血浆SPE的一点愚见,抛砖引玉,各位前辈多多指教。
这里面学问挺大的呀,以前做体内药分实验,没接触SPE,看来以后做代谢,需要向这方面努力了,多谢zl2008boy。