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主题：【第三届原创参赛】学习笔记之5种柱层析的特点总结

浏览0 回复5 电梯直达
老好人
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发表于：2010/10/26 15:06:23 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
维权声明：本文为xiaodaren原创作品，本作者与仪器信息网是该作品合法使用者，该作品暂不对外授权转载。其他任何网站、组织、单位或个人等将该作品在本站以外的任何媒体任何形式出现均属侵权违法行为，我们将追究法律责任。
写在前面的话：
  由于我是一位刚入门的新手，所以在方法的选择过程中总是对于不同的方法的特点记得不清楚，于是就有了这个总结，本文的内容不是我自己写出来的，但是是我参考了其他的文献，结合了自己的理解整理出来的笔记，请大家指正补充：
  在进行任何一种蛋白质纯化工艺设计之前,都需要我们尽可能多地先对目标蛋白和其中杂质的性质、提纯的体系进行了解。如目标蛋白质的相对分子质量、等电点、疏水性、带电性、碳氢链或自由巯基存在情况等。另外还需对影响目标蛋白活性的因素有了解,如温度、pH、有机溶剂、蛋白变性剂、重金属离子、机械剪切力等,以保证纯化后的蛋白活性。

也可采用早期的一些粗提方式了解这些性质,如可以通过GFC、IEC 技术,改变盐浓度成pH 梯度洗脱,对蛋白质相关性质进行预分析,也可通过电泳、电镜、超离心等测量已有的标准纯品,获得这些信息,然后再开始设计纯化。设计蛋白质纯化工艺时,一般都本着一条原则:在达到所需纯度和活性的前提下,采用最少的步骤,获得最大的回收率。前人总结归纳和分析了200个已成功地提纯蛋白质的中试工艺,结果表明,纯化步骤平均为4 步,这4 步除柱层析技术外,还包括超滤和超离心等技术。一般中试纯化工艺大体由三部分组成: (1) 粗提; (2) 纯化;(3) 精制。而且设计中试工艺也根据工作者的目的不同而不同。在这个过程中大家用的最多的方法就是柱层析的方法了，下面是我在学习过程中归纳的一些小Tips,说不上是很好，主要还是拿出来和大家一起分享，抛砖引玉，如果大家有更好的建议和归纳总结，欢迎分享出来！！
该帖子作者被版主 老多_小多加 15积分， 2经验，加分理由：原创大赛奖励
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emoc98311
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2010/10/26 22:02:55 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
好笔记，学习之道
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misfoever
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2010/10/27 16:02:56 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
谢谢，学习了
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果果
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2010/10/27 16:04:08 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
嗯 可以作为以后的参考 谢谢
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xjh1279
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2010/10/30 14:49:07 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
留存为以后备用
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zfbobo1218
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2011/1/16 12:59:13 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
好东西，以后有用！
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