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主题：【分享】微生物实验室标准操作程序质量手册

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发表于：2011/02/23 15:24:43 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊

标本处理区工作制度

进入本区需穿工作服、工作鞋。
本区只能进行：临床标本的保存，标本接种、培养、及其菌株检验前处理、菌悬液制备、染色标本检查、非上机鉴定与药敏试验操作等危险操作，其它操作不得在此区进行。
在整个本区的实验操作过程中，操作者必须戴手套、口罩和帽子，严格按照操作规程进行。
工作结束后必须立即对工作区进行清洁或消毒。
非本实验室工作人员未经允许不得进入。

试剂配制和无菌区工作制度
进入该区需穿专用工作服和工作鞋。
本区只能进行贮存试剂的制备、试剂的分装和平板的制备。
在整个本区的实验操作过程中，操作者必须戴手套和帽子，严格按照操作规程进行。
工作结束后必须立即对工作区进行清洁和消毒。
非本实验室工作人员未经允许不得进入。
无菌室公能用于分装培养管或倒制平板培养基操作。
使用前以紫外灯消毒至少30分钟，定期用乳酸熏蒸，彻底消毒。
无菌室仅限操作者进入，操作时严格关门。
室内备有空调设备，以保证不因温度而影响工作。
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2011/2/23 15:26:18 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
仪器自动分析区工作制度

进入本区需穿专用工作服和工作鞋。
本区只能进行：微生物上机鉴定与药敏分析、血培养仪增菌培养、培养基溶解与保温、相关实验记录与报告书写、打印；其它操作不得在此区进行。
在整个本区的实验操作过程中，操作者必须戴手套和帽子，严格按照操作规程进行。
工作结束后必须立即对工作区进行清洁。
非本实验室工作人员未经允许不得进入。

试剂贮存和配制区标准操作程序
目的：规定在本区进行的工作，确保试剂正确贮存和制备。
适用范围：试剂的贮存和制备。
职责：
3.1 实验室工作人员均应熟知并遵守本室相关SOP。
3.2 本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。
4  程序：
4.1 实验人员进入该区须穿本区专用工作服。实验中须戴手套、工作鞋。
4.2 实验室所购试剂经验收登记后，按说明书中的要求贮存。
4.3 记录温湿度计读数。
4.4 记录冰箱的温度计读数。根据当天的标本验收登记表，取出当天实验须配制和使用的试剂放置于即用冰箱，其余试剂要立即收好放回贮藏冰箱内。
4.5 不同厂家的试剂勿混用，同厂家的不同检测项目试剂盒中的相同试剂也不宜混用，除非厂家有特别说明。
4.6 做好详细实验记录。
4.7 实验完毕，清洁实验台面。
4.8 每周一清点库存试剂，看有无过期或将近到期的试剂，或作报废处理或排列优先使用，避免浪费，然后记录试剂的详细保存情况。
5.  引用的文件及表格：
5.1 项目SOP
5.2 实验室清洁程序：
5.3 冰箱温度记录表
5.4 温湿度计记录表
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2011/2/23 15:26:31 Last edit by 7336167
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2011/2/23 15:27:30 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
标本处理区标准操作程序

目的：规定在标本制备区内所进行的工作及其操作。
适用范围：所有在本区内进行的工作。
职责：
3.1 实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP。
3.2 本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。
标准操作：
1.1        实验人员进入该区须穿本室专用工作服
1.2        。实验中须使用一次性鞋套，
1.3        戴手手套，
1.4        手套需常更换每四小时换一次。
4.2从试剂贮存和准备区取出的试剂放入即用冰箱室试剂存放专区暂存。
4.3记录温湿度计读数。
4.4记录恒温箱的温度计读数。
4.5 临床标本的接收、保存，细菌手工鉴定或上机前处理在本区内进行。
4.6 标本的接收处理和保存按临床标本的管理程序进行：Pro-Sam。
4.7 不同检测项目的样本核酸的提取和保存按相应检测项目的SOP进行。
4.8 标本接种或涂片在本区的标本处理台内进行，接种后培养基按要求进行培养。菌落观察和处理在生物安全柜内进行。
4.9 详细做好实验记录和仪器使用记录。
4.10 保持室内空气流通，且在实验完毕后，按实验室清洁消毒程序进行清洁、消毒工作。
引用的文件及表格
5.1临床标本的管理程序进行：
5.2        项目SOP： 
5.3        实验室清洁程序：
5.4 恒温箱温度记录表：
5.5 温湿度计记录表：
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2011/2/23 15:28:19 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
细菌自动分析区标准操作程序

目的：规定在本区进行的工作，确保靶核酸扩增的准确性和有效性。
适用范围：血培养、自动分析和报告签发。
职责：
3.1 实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP。
3.2 本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。
标准操作：
4.1 实验人员进入该区须穿本区工作服。实验中须戴手套、帽子，手套需常更换。
4.2本实验室采取VITEK32微生物自动分析技术，因此，微生物自动鉴定和分析和肥达氏试验、外菲氏试验等均在本区内进行。
4.3 鉴定板在标本处理区准备后带入该区，放入充液箱充填，充填菌悬液后加塞，余液连同试管放入消毒桶中消毒，由工人过后洗涤回收试管。
4.4 每月必须进行至少一次所有试卡的质控，每新到的批号试剂要进行质控，过关方能投入使用。
4.5 依据不同检测项目SOP要求设定微生物检验工作程序，并记录备案；未经实验室负责人允许，不得随意更改。
4.6 检测报告的签发依据检测结果报告程序：Pro-Rep。
4.7 做好仪器和实验记录。
4.8 保持室内空气流通，且在实验完毕后，清洁、消毒工作台面。
引用的文件：
5.1 检测结果报告程序
5.2 项目SOP
5.3 实验室清洁程序
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2011/2/23 15:28:59 Last edit by 7336167
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2011/2/28 15:15:48 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
紫外消毒标准操作程序

目的：每天实验后，下班后对工作区进行必要的紫外线消毒一小时，保正实验室的清洁。
适用范围：适用于本室各工作区中按装于天化板上的紫外线消毒灯。
职责：
3.1 实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP。
3.2 本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。
操作程序：
4.1 实验结束后先对实验室进行必要的清洁工作；
4.2 根据需要设定时间，通常为30分钟，根据需要适当延长时间。
4.3 关闭电源开关；
4.4 整个紫外线消毒过程中，相关工作人员不能离开实验室，以防火灾发生。
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2011/2/28 15:20:08 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
消毒液配制使用标准操作程序

1、目的：
配制消毒液，用消毒液擦拭实验台面、用具及浸泡实验废弃物。
2、适用范围：
分子生物实验室的工作人员
3、职责：
3.1实验室工作人员应及时配制消毒液，熟知并遵守本SOP，严防污染发生。
3.2 本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。
4、工作程序：
4.1确定要配制消毒液的量。
4.2 将36%的次氯酸钠配制成10%的稀溶液。以1000毫升为例，取278毫升的36%的次氯酸钠母液，加蒸馏水至1000毫升。
4.3 消佳净：20g加水4000ml,作用20-30分钟。
4.4 所配制的消毒液只限在当天内使用，隔夜如使用时应根据本SOP重新配制。

普通冰箱使用标准操作程序

目的：确保冰箱的正常使用。
适用范围：本SOP适用于本室各类用途使用的普通冰箱、冰柜。
职责：
3.1 实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP。
3.2 本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。
操作程序：
4.1 开、关机：试剂冰箱按说明书要求放好后，插上电源线，冷藏室温度开关置于4℃，冷冻室温度开关置于 -20℃，2小时后用温度计确认。系统进入正常运行状态后即可正常使用。
4.2关机：若冰箱较长时间不用或需要送修时需按以下步骤操作：
（1）关闭冰箱电源，并拔下电源插头。
（2）清空冰箱内的所有贮存物，并妥善放置到其它冰箱内。打开冰箱门，等待冰箱内的霜化完。
（3）用肥皂水擦洗干净冰箱内胆，后用10%次氯酸钠液擦洗一次。
（4）保持冰箱门打开待其自然干燥。
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2011/2/28 16:16:31 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
超低温冰箱标准操作规程

确保低温冰箱的正常使用。
适用范围：本SOP适用于      公司的        型超低温冰箱。
职责：
3.1 实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP，室负责人监督落实。
3.2 本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。
操作程序
4.1 接通电源，将冰箱的开关置ON位置，此时温度显示屏显示冰箱的实际温度，且数字不停地闪烁。
4.2温度设定：以调节冰箱温度为-70℃为例说明，按SET键，温度指示显示-85℃，且“8”闪烁，按“↑”键直至“8“变为“7”；按“→”键，此时温度指示为“-75℃”，“5”闪烁，按“↑”键直至“5“变为“0”， 按SET键，此时温度指示“-70℃”，且不闪烁。
4.3 设定温度时应注意，一般应以10℃递减方式进行，即每次设定的温度低于冰箱实际温度10℃，待冰箱达到设定温度时再进行调节，直至达到所需温度。
4.3 如超低温度遇较长时间停电，其温度显示会不断闪烁，且报警指示灯（ALARM）也闪烁，此时应按上述方法调节。
4.4 由冰箱管理人或其委托人每工作日记录冰箱温度，冰箱温度记录表贴于冰箱门，每月更换1次，存档。
4.5 超低温冰箱由专人保管，试剂和物品应按指定位置存放。
4.6 超低温冰箱全室共用，若室外人员需存放试剂或标本，须经管理人同意。
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2011/2/28 16:17:04 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
洁净工作台使用操作规程
目的：正确使用洁净工作台。
本SOP适用于实验室使用的所有国产医用洁净工作台。
职责：
3.1 实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP，室负责人监督落实。
3.2 本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。
操作程序：
4.1 新安装或长期未使用的工作台，使用前必须用超净真空吸尘器或不产生纤维的物品认真进行清洁工作。
4.2 接通电源，使用前应提前15~30分钟同时开启紫外灯和风机组工作。
4.3 当需要调节风机风速时，用工作台操作面板上的风速调节钮进行调节。风机、照明均由批示灯指示其工作状态，工作时，发光。
4.4 工作台面上禁止存放不必要的物品，以保持工作区的洁净气流不受干扰。
4.5 禁止在工作台面上记录书写，工作时应尽量避免作明显扰动气流的动作；禁止在预过滤进风口部位放置物品，以免挡住进风口造成进风量减少，降低净化能力。
4.6 使用结束后，用消毒液清理工作台面后打开紫外灯，15~30分钟后关闭紫外灯，关闭洁净台电源。
4.7长期不使用的工作台请拨下电源插头。
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2011/2/28 16:21:37 Last edit by 7336167
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2011/2/28 16:17:42 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
VITEK32全自动微生物分析系统标准操作程序
（待补充）

回目录

移液器使用标准操作程序
目的：正确使用移液器，确保移液的精确性。
适用范围：本实验室使用的可调式移液。
职责：实验室工作人员必须严格按照本SOP进行操作。
操作程序：
4.1 转动旋钮设定移液量，设定的移液量不可超出该移液器规定的范围。
4.2 装上配套的Tip。
4.3 前进移液法
4.3.1 将按钮压至第一停点位置；
4.3.2 将移液管管嘴浸入液面下2~3mm深处，然后慢慢松开按钮吸入液体。待移入管嘴吸满液体后，将管嘴撤出液面，擦掉管嘴外侧的所有液滴。
4.3.3 轻轻压下操作按钮至第一停点位置，放出液体。约1秒钟后，继续将操作按钮向下压至第二停点位置。待管嘴液体放干净后，将管嘴贴在容器瓶壁上防止形成液滴滴入瓶中，撤出管嘴。
4.3.4 松开按钮使之回到起点位置。需要时，可更换管嘴继续移液操作。
4.4 倒退移液法：适用于高粘度液体及/或易起泡沫液体的移液。
4.4.1 将操作按钮向下压至第二停点位置。
4.4.2将移液管管嘴浸入试剂瓶液面下2~3mm深处，然后慢慢松开钮吸入液体。待移入管嘴吸满液体后，将管嘴撤出液面，擦掉管嘴外侧的所有液滴。
4.4.3 轻轻压下操作按钮至第一停点位置，放出液体。
4.4.4遗留在管嘴时的液体或者随管嘴一起扔掉，或者放回原来的容器中。
4.5重复操作法：重复操作移液法可以快速、简便地重复转移同体积的同种液体。
4.5.1将操作按钮向下压至第二停点位置。
4.5.2将移液管管嘴浸入液面下2~3mm深处，然后慢慢松开按钮吸入液体。待移入管嘴吸满液体后，将管嘴贴在容器瓶壁上防止形成液滴滴入瓶中。
4.5.3 轻轻压下操作按钮至第一停点位置，放出液体。待放完所需体积液体后，把按钮停在第一停点位置，不包括在移液量之内的少量液体仍留在管嘴内，管嘴外的液滴则需包括在移液量之内。
4.5.4将管嘴浸入试剂液面下不远处，然后慢慢松开按钮使管嘴重新吸入液体。
4.5.5重复步序4.5.3和4.5.4继续移液操作，就可重复转移相同体积液体。
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2011/2/28 16:18:26 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
离心机操作标准操作程序

目的：使每个工作人员能正确地使用本仪器。
范围：本SOP仅适用于各类普通离心机。
职责：
3.1 实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP，室负责人监督落实。
3.2 本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。
操作：
4.1 开机：接通电源，打开仪器电源开关，离心机自检。
4.2 按“Open”键，打开机盖，旋开转子盖，平衡放入离心管，旋紧转子盖，关上机盖，此时“Open”键的指标灯亮。（如果接通电源后，机盖为开的状态，则无需此步操作）。
4.3 离心条件的设定：通过按“Temp”、“Speed”、“Time”键的上下箭头分别设定离心的温度、速度和时间。其中离心速度可分为每分钟转速（rpm）和离心力（cfg）两种，可通过同时按下“Speed”键的上下键头相互转换。
4.4 运行：离心条件设定好后，按“Start/Stop”键，离心机启动，“Open”键的指标灯灭。当达到设定的时间后，离心机自动停止，并发出提示音，“Open”键的指标灯亮，按“Open”键，打开机盖，旋开转子盖，取出离心管。
*若进行样本的短暂离心，只需按“Short”键数秒即可。
*若需在离心过程中停止离心，则需再按一次“Start/Stop”键。
4.5 关机：离心完毕后，应及时用干的软布拭去离心室的冷凝水，关闭离心机电源，并记录离记机使用情况。
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冰箱维护和保养标准操作程序
目的：对冰箱进行适当的维护，以确保冰箱的正常使用。
适用冰箱范围：本实验室使用的各种品牌、型号的冰箱。
职责：
3.1 实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP，室负责人监督落实。
3.2 本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。
操作方法
4.1 冰箱应放置于水平地面并留有一定的散热空间。
4.2 外接电源电压必须匹配，并要求有良好的接地线。
4.3 冰箱内禁止存放与本实验室无关的物品。
4.4 放入冰箱内的所有试剂、样品、质控品等必须密封保存。
4.5 保持冰箱出水口通畅；非自动除霜冰箱应定期除霜；定期清洁冰箱，清洁时切断电源，用软布蘸水擦拭冰箱内外，必要时可用中性洗涤剂。
4.6 每日由专人负责观察冰箱内温度并记录于表中，记录表贴于门上，每月一张，一年装订成册存档。
4.7 若温度超出规定范围，调节温控使其回到正常范围，并进行记录。   
4.8 若温控调节无效，报请设备科维修，修理后须验收合格并签字后方能正常使用。
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