紫外可见分光光度计(UV)

主题:【求助】求助!请问下测出的吸光度值是负值是什么意思???

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suifengmengying
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用Lowry法测蛋白质含量,做标准曲线的时候,每个标准浓度下测出的吸光度值都是负数,请问各位高手这是怎么回事啊??怎么解决这种现象呢??万分感谢...
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tutm
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“做标准曲线的时候,每个标准浓度下测出的吸光度值都是负数”?

你的溶液用肉眼看,是不是随浓度提高颜色变深?

如果不是,可能是你的显色处理或试剂有问题;
如果是,那可能是你的仪器操作有问题,检测波长是多少?
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suifengmengying
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“做标准曲线的时候,每个标准浓度下测出的吸光度值都是负数”?

你的溶液用肉眼看,是不是随浓度提高颜色变深?

如果不是,可能是你的显色处理或试剂有问题;
如果是,那可能是你的仪器操作有问题,检测波长是多少?

溶液颜色的确是随着浓度增大而变深的,那应该是操作的问题了,请问下操作一般在哪些地方出问题了呢
tutm
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不知你用的是双光束仪器还是单光束的,如果是前者会不会是样品和参比放反了。

最好描述一下你是怎么做的。
夕阳
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用Lowry法测蛋白质含量,做标准曲线的时候,每个标准浓度下测出的吸光度值都是负数,请问各位高手这是怎么回事啊??怎么解决这种现象呢??万分感谢...


(1)仪器作了基线校正或调零了吗?
(2)仪器使用的参比溶液与标准溶液的本底是同一种物质吗?
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suifengmengying
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不知你用的是双光束仪器还是单光束的,如果是前者会不会是样品和参比放反了。

最好描述一下你是怎么做的。

刚开始已经校零的了,我使用的是TU-1990双光束紫外分光光度计,样品池只能放两个比色皿,靠近外边这个比色皿装的是参比溶液,而靠近里边那个是装样品的,不知道放反没有啊
tutm
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不知你用的是双光束仪器还是单光束的,如果是前者会不会是样品和参比放反了。

最好描述一下你是怎么做的。

刚开始已经校零的了,我使用的是TU-1990双光束紫外分光光度计,样品池只能放两个比色皿,靠近外边这个比色皿装的是参比溶液,而靠近里边那个是装样品的,不知道放反没有啊


呵呵,就是放反了呀!
靠你自己的外边这个应该放样品,远离你的里边那个放参比。
夕阳
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刚开始已经校零的了,我使用的是TU-1990双光束紫外分光光度计,样品池只能放两个比色皿,靠近外边这个比色皿装的是参比溶液,而靠近里边那个是装样品的,不知道放反没有啊


呵呵,就是放反了呀!
靠你自己的外边这个应该放样品,远离你的里边那个放参比。

utm 老师的判断是对的。

一般而言,双光束的仪器,靠近前面的是放置样品溶液的,靠近后面的是放置参比溶液的。
夕阳
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不知你用的是双光束仪器还是单光束的,如果是前者会不会是样品和参比放反了。

最好描述一下你是怎么做的。


太有先见之明了,不愧是老手!经验太丰富啦!
tutm
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不知你用的是双光束仪器还是单光束的,如果是前者会不会是样品和参比放反了。

最好描述一下你是怎么做的。


太有先见之明了,不愧是老手!经验太丰富啦!

呵呵,猜的。因为这位版友测得的全部是负值,而颜色深浅又是正常,通常这是不太可能的,最多浓度低的1-2个会有可能负的;因此估计他放错位置了。
suifengmengying
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不知你用的是双光束仪器还是单光束的,如果是前者会不会是样品和参比放反了。

最好描述一下你是怎么做的。


太有先见之明了,不愧是老手!经验太丰富啦!

呵呵,猜的。因为这位版友测得的全部是负值,而颜色深浅又是正常,通常这是不太可能的,最多浓度低的1-2个会有可能负的;因此估计他放错位置了。

嘿嘿,,真是感激不尽啊!!
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