代表着流式细胞仪重要创新、市场上第一台用声波精确控制细胞移动的流式细胞计数系统,是一款由美国能源部国家实验室(洛斯阿拉莫斯国家实验室)研制的新型流式细胞分析仪,去年春天由ABI(Life Technologies)公司投入到了市场,不单荣获了TheScientist杂志2010十大创新技术,也被生物通读者投票入选2010年生物通生命科学十大创新产品。
流式细胞仪的原理在于让细胞逐个穿过激光检测设备,从而使科学家们得以对细胞进行计数和检测。过去,研究人员必须在其灵敏分辨率和样品进样分析速度两者之间二选一,取其平衡点。原因在于传统的流式细胞仪由快速流动的鞘液流带动样品轴流经过激光检测器。要加大样品进样分析速度就必须加大样品轴流直径,这意味着样品流中细胞分散度扩大,细胞容易偏离激光检测焦点——细胞偏离激光中心越远则激发光强度变化越大,CV值越高——这就导致样品分辨率下降——因此过去往往要为灵敏度而牺牲通量。
Attune声波聚焦流式细胞仪通过一个看似简单的原理——利用超声波(超过2MHz,类似于医学成像中使用的超声波)将细胞紧密聚集在激光检测点的样品轴流中轴线上,避免细胞随轴流加宽而分散。这种声波聚焦在很大程度上与样品进样流速无关,不论样品流与鞘液流的比例如何,都可以使细胞紧密地聚集于激光检测焦点,避免分散。即使是在高达1mL/min的高样品流速下,照样可以维持精确的细胞排列——Attune流式细胞仪实现了在高进样流速下的高精确检测,能够同时将速度和分辨率最大化,并在检测点开展cell-by-cell的细胞分析,解决了过去需要在灵敏度和速度之间折中的这个矛盾。所获得的数据CV值低,峰更窄,峰分辨率高,分离更好,且数据更易阐释。
Attune实现这一切并不需要采用可能伤害细胞的高速或大体积鞘流。由于不受物理鞘液流的限制,因而操作人员可以控制细胞通过激光光路的时间,这就意味着在分析微弱信号时,还可以减慢细胞的流速,延长细胞被照亮的时间,以便采集更多的光量子,从而获得更清楚明确的结果以及更好地分离。高精度进样泵还可完成绝对细胞计数——进一步将费用和样品制备时间降低。
Attune每次运行可收集高达2,000万个细胞,流速可高达1000 μL/min,比其他细胞仪快10倍以上,且收集速率可在25-1,000 μL/min之间进行调整,4分钟内分析多达4 mL样品!