主题:【讨论】平时液相色谱测定样品的时候,大家如何选择波长的?

浏览0 回复30 电梯直达
马踏飞燕
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原文由 fengmo4668(fengmo4668) 发表:
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原文由 小卢(luxw) 发表:
关于最大吸收一般情况下是告知的,如果未知,可以用dad看下最大吸收在哪里


卢版:
那么测定组分复杂的情况下呢?


卢版都说了么,用dad来扫描各自的紫外吸收波长。
这个的前提是要先筛选出合适的色谱条件将复杂的组份完全分开。


哦,我笨拙 那么对“譬如254nm 对常见的共轭结构和羰基官能团都有吸收,对饱和基团也有弱的吸收。但是对于常见的乙腈、甲醇的透过率很高,实在不知道用什么波长是最理想的实验波长??”这个该如何选择呢???请教了。


前半句,是说254nm对于一般的物质来说,都可以作为选择对象。
“常见的乙腈、甲醇的透过率高”,说明乙腈、甲醇在254nm处的吸光度很小,对样品的影响很小。

其它行业不知道,对于制药行业来说,主成分的有关物质会要求比较严格。
选择其它波长,可能在在这个波长下没有那么多的杂质峰出现。
但是在这个波长下的紫外检测器检测不到杂质峰,不代表该地方没有杂质峰。
所以,对波长没有特别要求时,做有关物质,254nm就非常有利了。


哦,原来如此哈,我就说怎么看上去那么别扭呢。谢谢了。
马踏飞燕
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原文由 ruifen0000(ruifen0000) 发表:
先用DAD做方法,找个方法使得杂质和主峰完全分离,然后选择主峰的最大吸收波长作为检测波长用外标法定量就可以了 。


谢谢您的解说,卢版已经说了,我明白了,再次感谢您的热心帮助。
东风恶
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特别是复方制剂的有关物质检测,要注意杂质的归属。
xue2009
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如果是测定主成分物质的含量,把波长设定在最大吸收波长处会更灵敏,如果在主成分的最大吸收波长处杂质成分也有很强的吸收,这样可能会造成干扰,那么则考虑把波长不设置在最大波长处。
xuhua987
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原文由 xue2009(xue2009) 发表:
如果是测定主成分物质的含量,把波长设定在最大吸收波长处会更灵敏,如果在主成分的最大吸收波长处杂质成分也有很强的吸收,这样可能会造成干扰,那么则考虑把波长不设置在最大波长处。


如果在主成分的最大吸收波长处杂质成分也有很强的吸收,我觉得也可以通过调整和优化流动相等方式增大流动相对主成分和杂质的选择性的差异,从而达到避免干扰的目的。
ruan5058
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针对第三点,我是这样理解的:
因为是使用到外标法了,除了所需要的目标物质以为,
其他的都可以不用取管了,
那我就取目标物质的特征波长,
只有在该特征波长下,才能取得目标物质的最大响应值
以此来提高目标物质的检出限。

不知道正确与否,求指导。
阿三
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arvid2007
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原文由 xue2009(xue2009) 发表:
如果是测定主成分物质的含量,把波长设定在最大吸收波长处会更灵敏,如果在主成分的最大吸收波长处杂质成分也有很强的吸收,这样可能会造成干扰,那么则考虑把波长不设置在最大波长处。

的确,第二种情况下,就要选择次灵敏吸收的波长,有时并不是最大吸收波长就是最好的
arvid2007
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原文由 东风恶(luoleqc) 发表:
特别是复方制剂的有关物质检测,要注意杂质的归属。

看来药物分析的干扰比较大啊,基质都挺复杂的
arvid2007
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原文由 xuhua987(xuhua987) 发表:
原文由 xue2009(xue2009) 发表:
如果是测定主成分物质的含量,把波长设定在最大吸收波长处会更灵敏,如果在主成分的最大吸收波长处杂质成分也有很强的吸收,这样可能会造成干扰,那么则考虑把波长不设置在最大波长处。


如果在主成分的最大吸收波长处杂质成分也有很强的吸收,我觉得也可以通过调整和优化流动相等方式增大流动相对主成分和杂质的选择性的差异,从而达到避免干扰的目的。

这种优化方式好像没听说过,以后有机会可以试试看
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