主题:【求助】请问用微量流通池会造成信号损失吗

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kakalhh
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如题,当标准流通池(10ul)换成微量流通池(2ul)时,如果还用普通色谱柱,进样体积大于10ul,会造成DAD采集的信号损失吗?
该帖子作者被版主 zhaohua80112积分, 2经验,加分理由:不错的想法
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zhaohua8011
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有水有渝
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楼主能说的详细一点吗,自行更换了检测池,那检测池与光路对的准吗?
kakalhh
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原文由 有水有渝(xky0230699) 发表:
楼主能说的详细一点吗,自行更换了检测池,那检测池与光路对的准吗?


只是更换流通池,是根据厂家优化方法的资料更换的,而且流通池的型号也是与检测器匹配的,区别仅为一个是标准的,一个是微量的。因为我们要做小粒径且内径为2.1的快速柱,标准流通池的话会造成峰展宽,所以更换成微量流通池,我现在的问题是,我们不想再把微量流通池再换成标准流通池,可不可做普通的色谱柱如5um,4.6的,做的话会不会造成信号损失?有什么办法解决?减小进样量行不行?
老多_小多
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流通池还跟你的流动相流量有关系吧,而不是简单更改进样量就行
pandora98
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流通池变小,会导致光路变小,光程变短,紫外光被样品吸收的能量减少,导致相同条件下,小流通池比大流通池对同一浓度样品的吸收峰面积变小。
kakalhh
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原文由 pandora98(pandora98) 发表:
流通池变小,会导致光路变小,光程变短,紫外光被样品吸收的能量减少,导致相同条件下,小流通池比大流通池对同一浓度样品的吸收峰面积变小。


谢谢!
有水有渝
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原文由 pandora98(pandora98) 发表:
流通池变小,会导致光路变小,光程变短,紫外光被样品吸收的能量减少,导致相同条件下,小流通池比大流通池对同一浓度样品的吸收峰面积变小。


我只是从理论想象上去理解,其实楼主去实践一次不就行了吗,更换一下检测池也很简单。

“小流通池比大流通池对同一浓度样品的吸收峰面积变小”
这个我不是很赞同,因为换小径柱,填料粒径应该也是小的吧,还有小体积检测池,那管路也要更换成小内径的才能匹配,相同的进样量组分通过检测池的时间是不是也会延长呢,是不是会增加峰宽,这样综合一下,峰面积一定是变小的吗?
pandora98
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实际上这个问题我仔细研究过的,因为我也曾经换过小体积的流通池,结果就是峰面积变小了。
拆开流通池你就会发现,样品吸收紫外光能量时,其流动方向是与光路平行的,而不是想象当中的垂直。
换小体积的流通池,必然是这段平行距离的缩短,样品流经流通池的时间缩短,直接导致单位样品(与样品浓度和体积无关)与紫外光接触的时间减少,另外管路内径变小也会导致相同流速下样品流经流通池的速度变快,与紫外光接触的时间减少,所以峰面积一定变小。
反过来,其它所有条件都不变的情况下,流速减慢一半,样品峰面积会相应增加一倍
原文由 有水有渝(xky0230699) 发表:
原文由 pandora98(pandora98) 发表:
流通池变小,会导致光路变小,光程变短,紫外光被样品吸收的能量减少,导致相同条件下,小流通池比大流通池对同一浓度样品的吸收峰面积变小。


我只是从理论想象上去理解,其实楼主去实践一次不就行了吗,更换一下检测池也很简单。

“小流通池比大流通池对同一浓度样品的吸收峰面积变小”
这个我不是很赞同,因为换小径柱,填料粒径应该也是小的吧,还有小体积检测池,那管路也要更换成小内径的才能匹配,相同的进样量组分通过检测池的时间是不是也会延长呢,是不是会增加峰宽,这样综合一下,峰面积一定是变小的吗?
peterhello
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原文由 pandora98(pandora98) 发表:
实际上这个问题我仔细研究过的,因为我也曾经换过小体积的流通池,结果就是峰面积变小了。
拆开流通池你就会发现,样品吸收紫外光能量时,其流动方向是与光路平行的,而不是想象当中的垂直。
换小体积的流通池,必然是这段平行距离的缩短,样品流经流通池的时间缩短,直接导致单位样品(与样品浓度和体积无关)与紫外光接触的时间减少,另外管路内径变小也会导致相同流速下样品流经流通池的速度变快,与紫外光接触的时间减少,所以峰面积一定变小。
反过来,其它所有条件都不变的情况下,流速减慢一半,样品峰面积会相应增加一倍
原文由 有水有渝(xky0230699) 发表:
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流通池变小,会导致光路变小,光程变短,紫外光被样品吸收的能量减少,导致相同条件下,小流通池比大流通池对同一浓度样品的吸收峰面积变小。


我只是从理论想象上去理解,其实楼主去实践一次不就行了吗,更换一下检测池也很简单。

“小流通池比大流通池对同一浓度样品的吸收峰面积变小”
这个我不是很赞同,因为换小径柱,填料粒径应该也是小的吧,还有小体积检测池,那管路也要更换成小内径的才能匹配,相同的进样量组分通过检测池的时间是不是也会延长呢,是不是会增加峰宽,这样综合一下,峰面积一定是变小的吗?

做类似UPLC的方式时换小体积流通池主要是为了减小峰展宽,保持尖锐的峰型,峰面积变小不会是大问题的,信噪比肯定是提高的.而常规液相则完全没有必要使用小流通池
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