主题:【讨论】【全民抗日,国货当自强】月旭SEC柱有奖竞答(第五题)

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幽灵龙猫
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水相中加缓冲盐对目标物分离的优点:缓冲盐,从字面就可以很好的理解,是能够在一定范围内抵御外界的影响,维持pH值不变,蛋白质或者是其它大分子化合物不可能都是中性的,反而大部分都是会一定程度的解离,所以加入缓冲盐的目的是为了维持这些待分析物稳定性,从而保证了分离结果的可重现性和稳定性。
该帖子作者被版主 xue20092积分, 2经验,加分理由:回答的很好
dahua1981
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水相中的缓冲盐,主要是起到抑制样品解离的作用,使样品成分子状态,峰型较好。
加入缓冲盐对目标物分离有改善峰型(有些很难分离的物质使用缓冲液后分离非常漂亮),减少峰拖尾,改善分离度。
dahua1981
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对于样品来说,可以抑制样品的离解!有很好的保留!也从而改善了峰型!
对于固定相来说加缓冲盐,可以抑制柱子中硅醇基与易离解的物质间的离子交换,导致峰拖尾等
huaibeijiayuan
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液相色谱中,缓冲盐的作用主要是调节pH值,通过pH值控制待测化合物的解离程度,从而达到调整保留时间的目的。一般,待测物是酸性,则流动相的pH值偏酸性,反之则偏碱性,抑制待测物的解离。
samanthalas
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大家把缓冲盐的作用都阐述的很好啊!
不过本题的第一问:"对于这款UltimateSEC柱(亲水硅胶蛋白柱),为什么药典规定在分析时水相中一般会加缓冲盐?"
似乎还没有很正面的回答.
缓冲盐的使用是很好,但是和SEC柱子的应用有什么关系呢?
dahua1981
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对于第一个问题:
我认为主要可能是因为UltimateSEC柱含有二醇基官能团,二在二醇硅胶中,组分保留均随盐浓度增加而增强。
第二个问题:
水相中的缓冲盐,主要是起到抑制样品解离的作用,使样品成分子状态,峰型较好。
加入缓冲盐对目标物分离有改善峰型(有些很难分离的物质使用缓冲液后分离非常漂亮),减少峰拖尾,改善分离度。
该帖子作者被版主 xue20092积分, 2经验,加分理由:后一个回答的有道理,前一个回答值得商榷哦
dahua1981
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对于第一个问题:
我认为主要可能是因为UltimateSEC柱含有二醇基官能团,而在二醇硅胶中,缓冲液流动相有助于提高组分的保留时间,提高分离效率。
第二个问题:
水相中的缓冲盐,主要是起到抑制样品解离的作用,使样品成分子状态,峰型较好。
加入缓冲盐对目标物分离有改善峰型(有些很难分离的物质使用缓冲液后分离非常漂亮),减少峰拖尾,改善分离度。
yu3226033
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原文由 dahua1981(dahua1981) 发表:
对于第一个问题:
我认为主要可能是因为UltimateSEC柱含有二醇基官能团,二在二醇硅胶中,组分保留均随盐浓度增加而增强。
第二个问题:
水相中的缓冲盐,主要是起到抑制样品解离的作用,使样品成分子状态,峰型较好。
加入缓冲盐对目标物分离有改善峰型(有些很难分离的物质使用缓冲液后分离非常漂亮),减少峰拖尾,改善分离度。
第一个问题俺有了吗?
xue2009
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可以从蛋白,多肽等生物目标物都是两性的,流动相添加缓冲盐可使它以某一种形式稳定存在,这样便于获得较好的峰型来回答。大家的思路很正确哈
dahua1981
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对于第一个问题:
我认为主要可能是因为蛋白,多肽等生物目标物含有多种官能团都是两性的,流动相添加缓冲盐可使它以某一种稳定形式存在,这样可以增强固定相和目标物之间的相互作用,便于获得较好的峰型。
第二个问题:水相中的缓冲盐,主要是起到抑制样品解离的作用,使样品成分子状态,峰型较好。加入缓冲盐对目标物分离有改善峰型(有些很难分离的物质使用缓冲液后分离非常漂亮),减少峰拖尾,改善分离度。
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2012/9/24 15:37:15 Last edit by dahua1981
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