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凝胶色谱（GPC）

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主题：请问各位大侠，GPC峰出现分裂是什么原因？

浏览0 回复6 电梯直达

maqaian0806

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发表于：2013/04/10 15:52:44 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

悬赏金额：50积分状态：未解决

各位大侠，最近测样遇到些问题，进的每个样品的峰都会在峰的最高处发生分裂，咨询了工程师说可能是柱子被污染了，或是柱子塌陷，但是柱压没怎么升高呢？我现在就是在小流量的冲柱子，但感觉冲下来的希望不大，请问各位大侠有什么好的建议吗？跪求解决办法，先谢过啦

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2013/4/10 19:00:55 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

有没有搞错过流动相？

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小不董

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2013/4/13 9:22:50 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

帮你付上照片，这样更直观，不制动你在分析标准样品，单标也是这样吗？流动相和条件是否有改变？

看你的这个图，应该是用的两根柱子吧，22min，时间不是很够，溶剂峰还没完全出来，如果连续进样，很容易干扰下一个样品的分析。第一个图，若是两个分子量的物质，而且分子量至少相差一个数量级，其实这图很漂亮，分得很好。若说肯定是单一分子量的物质就要考虑。

第二图，分子量明显小了好多，已经达到柱子的分离极限，不知道你的这柱子分离极限是多少。不过定性的分析，还是可以参i的。

通过你这两个图的最后一个峰判断，柱子性能应该还好的，重现性也可以，至于你为什么说现在出现两个峰不正常，只有你才对样品比较了解，可以进个单标，窄分子的标样，进一针再判断是否柱子的原因。

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2013/4/13 9:36:52 Last edit by doxw0323

histone1

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2013/4/17 14:28:42 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

窄分布的标样也是这样吗？

如果是：

我的建议是，把两根色谱柱分开来，用窄分布标样一根一根试，看还有没有裂峰。

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闻禾

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2013/4/18 16:37:24 地毯管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 小不董(doxw0323) 发表:

第一张图是标准品？如果是未知样品，这样的分离也算不错。如果是标品组合，凑合也能用，但可以通过选择分子质量相差更大的标品组配就更好了。

第二张图表明，所选凝胶柱已不太合适，可以选择更适合小分子测定的凝胶柱，以便得到分离更好，出峰位置更好的GPC曲线。

题外话：

在GPC测试中，我们也经常得到与第二张很相似的色谱图，但出峰比较靠中间位置。但因我们的实验主要是为监控实验过程变化，且已采用三根柱子（再加柱子，分析时间就太长了）。我的意思是，满足需要，一切从简。

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