主题:【讨论】关于碱性化合物的分析条件

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xiaowang268
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含氮的有机碱性化合物的色谱分析,一般首选什么柱子呢?缓冲盐首选什么呢?Ph高和低,哪个更好些呢?
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首选应用较广的C18柱


有用过的吗,推荐一下吧
xiaowang268
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Ph偏酸还是偏碱好些呢?首次分析时,优先考虑多少的Ph呢
erge
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碱性化合物一般加碱来控制峰形吧?


一般都加入哪些呢?
zhoujin83
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这不一定的,有些碱性化合物在酸性条件下仍然有好的峰型和保留,但是有些就不行,需要碱性流动相甚至是离子对。有的化合物,虽然带有胺基,甚至是伯胺,但是极性仍然很小。缓冲盐么,没什么特别的要求,只是最好选择在要的pH值在这个缓冲盐的缓冲范围内。
当然,后续的研究可能还会更换缓冲盐,比如前不久我做的一个项目,开始用的是乙酸铵,pH4.0,分离度不是很好,后来换成甲酸铵,虽然在pH4.0缓冲能力稍弱,但是分离度的问题解决了。
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xiaowang268
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这不一定的,有些碱性化合物在酸性条件下仍然有好的峰型和保留,但是有些就不行,需要碱性流动相甚至是离子对。有的化合物,虽然带有胺基,甚至是伯胺,但是极性仍然很小。缓冲盐么,没什么特别的要求,只是最好选择在要的pH值在这个缓冲盐的缓冲范围内。
当然,后续的研究可能还会更换缓冲盐,比如前不久我做的一个项目,开始用的是乙酸铵,pH4.0,分离度不是很好,后来换成甲酸铵,虽然在pH4.0缓冲能力稍弱,但是分离度的问题解决了。


看来还是要具体情况具体对待啊
xiaowang268
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这不一定的,有些碱性化合物在酸性条件下仍然有好的峰型和保留,但是有些就不行,需要碱性流动相甚至是离子对。有的化合物,虽然带有胺基,甚至是伯胺,但是极性仍然很小。缓冲盐么,没什么特别的要求,只是最好选择在要的pH值在这个缓冲盐的缓冲范围内。
当然,后续的研究可能还会更换缓冲盐,比如前不久我做的一个项目,开始用的是乙酸铵,pH4.0,分离度不是很好,后来换成甲酸铵,虽然在pH4.0缓冲能力稍弱,但是分离度的问题解决了。


如果一个碱性化合物不知道其Pka值,怎么办呢?
zhoujin83
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这不一定的,有些碱性化合物在酸性条件下仍然有好的峰型和保留,但是有些就不行,需要碱性流动相甚至是离子对。有的化合物,虽然带有胺基,甚至是伯胺,但是极性仍然很小。缓冲盐么,没什么特别的要求,只是最好选择在要的pH值在这个缓冲盐的缓冲范围内。
当然,后续的研究可能还会更换缓冲盐,比如前不久我做的一个项目,开始用的是乙酸铵,pH4.0,分离度不是很好,后来换成甲酸铵,虽然在pH4.0缓冲能力稍弱,但是分离度的问题解决了。


如果一个碱性化合物不知道其Pka值,怎么办呢?


其实大多数化合物的pKa值都不能直接查到吧,因为带氨基的化合物一般都呈碱性,所以我们用酸性条件就能得到稳定的HPLC条件(当然这也需要做实验确认,我们的做饭是连续进样两次,看能不能得到完全一样的色谱图)。如果保留不合适,那就尝试碱性条件,如果还不行,就尝试离子对。
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这不一定的,有些碱性化合物在酸性条件下仍然有好的峰型和保留,但是有些就不行,需要碱性流动相甚至是离子对。有的化合物,虽然带有胺基,甚至是伯胺,但是极性仍然很小。缓冲盐么,没什么特别的要求,只是最好选择在要的pH值在这个缓冲盐的缓冲范围内。
当然,后续的研究可能还会更换缓冲盐,比如前不久我做的一个项目,开始用的是乙酸铵,pH4.0,分离度不是很好,后来换成甲酸铵,虽然在pH4.0缓冲能力稍弱,但是分离度的问题解决了。


如果一个碱性化合物不知道其Pka值,怎么办呢?


其实大多数化合物的pKa值都不能直接查到吧,因为带氨基的化合物一般都呈碱性,所以我们用酸性条件就能得到稳定的HPLC条件(当然这也需要做实验确认,我们的做饭是连续进样两次,看能不能得到完全一样的色谱图)。如果保留不合适,那就尝试碱性条件,如果还不行,就尝试离子对。


但选择酸碱性时,也要看柱子的耐受范围吧
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