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GPC玻璃净化柱安装及测试
图1 玻璃柱双密封圈柱塞
图2 璃柱底座和液体管路
将图1密封活塞和图2玻璃柱底座及液路连接，如图3
图3 活塞和管路连接
将图3连接好后插入玻璃柱，如图4，之后将密封圈锁紧，与玻璃壁挤压，密封完好。
图4活塞插入玻璃柱
图5是装好的底座，图6是玻璃净化柱顶端可调节柱塞，带有很长的拉杆，方便调节活塞位置及柱内填料松紧度，由于填料粒径较大，所以柱压很小，新柱大约50Psi以内。
图5 安装好的玻璃净化住底座
图6 顶端柱塞
1、密封圈密封度调节螺母；2、柱塞在玻璃柱内上下调节螺母；3、玻璃柱端头锁紧螺母。填料S-X3用乙酸乙酯环己烷（1:1）浸泡，用玻璃漏斗将填料导入玻璃柱，之后两端密封完好，分别有两根管路输送流动相。
图7 装填好的玻璃柱
玻璃柱填装好后接入GPC凝胶净化色谱系统，待柱内气泡排除之后，继续用乙酸乙酯环己烷（1:1）冲洗，直到紫外检测器基线相对稳定。
小贴士：装填好的玻璃净化住准备测试，流路方向与装填方向相反，把填装过程底端翻转过来可以减小压力。
二、分离度测试
采用不同分子量的标准品进行测试。大分子物质最先流出净化住，小分子最后流出。
结论：以上图谱中四个组分均有很好的分离度，所以所装填的玻璃柱可以达到要求。
新装的玻璃柱连接GPC600进行分离
分离过程
实验条件
问题来了：已知GPC凝胶净化色谱分离原理是利用凝胶孔的空间尺寸效应，所以大分子物质从凝胶颗粒四周经过因而走的路径较短，相反，小分子走的路径较长，所以溶质按分子大小依次流出。但上述试样中苏丹红分子量大于2,4二硝基苯肼，理论上是苏丹红先流出，而实验中却正相反，为何？求解释......
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