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主题：【求助】回收率计算的问题

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独行菜
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发表于：2014/08/01 20:26:09 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
大家帮忙看下这个问题：

新绘制的标准曲线：y = 0.9709x + 0.0128 ；相关系数为0.9998。做空白加标回收如下：

浓度      回收率

0.01      170-200

0.05      80-100

0.1        80-100

0.5        80-100



为什么就只有0.01mg/L浓度的回收率偏高那么多？
该帖子作者被版主 郭景祎加 2积分， 2经验，加分理由：话题
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2014/8/1 21:49:14 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
分光光度法？
估计是空白的问题，空白有没有跟着做？即每次测定样品（不管是实际样品，还是空白加标样品），均需同时测定2个以上空白，所有样品的测定结果均减去该批次空白的结果；如果空白的响应值变动比较厉害，则会导致低浓度加标样品的测定结果波段较大。

当然也得排除器皿、试剂是否被污染；如果环境因素影响比较明显的，还得考虑环境因素的变化；一点点的污染，对于低浓度样品来说，影响很大，对中等以上浓度的样品，估计影响很小。要减小这些影响，最好是重做标准曲线。
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2014/8/1 21:53:26 Last edit by yzhlai
xuezi6473
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2014/8/1 22:34:44 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
同意，低浓度的加标回收率建议多做几次空白值。
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郭景祎
guojingyi-2010
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2014/8/1 22:36:50 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
浓度越低，准确度越低，要选择合适的曲线和加标量
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独行菜
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2014/8/2 9:23:59 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 谁折腾(yzhlai) 发表:
分光光度法？
估计是空白的问题，空白有没有跟着做？即每次测定样品（不管是实际样品，还是空白加标样品），均需同时测定2个以上空白，所有样品的测定结果均减去该批次空白的结果；如果空白的响应值变动比较厉害，则会导致低浓度加标样品的测定结果波段较大。

当然也得排除器皿、试剂是否被污染；如果环境因素影响比较明显的，还得考虑环境因素的变化；一点点的污染，对于低浓度样品来说，影响很大，对中等以上浓度的样品，估计影响很小。要减小这些影响，最好是重做标准曲线。


做标准曲线时，0.01mg/L吸光度为0.005，由此得出上面的标准曲线。但这次做空白加标回收，0.01mg/L加标样吸光度同样测得为0.005，代入曲线的浓度为0.01765，回收率就170多了。

曲线方程y=bx+a，当吸光度x为0时，y=a=0.0128mg/L，标准曲线对a值有什么要求和规定吗？
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独行菜
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2014/8/2 9:25:42 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 xuezi6473(xuezi6473) 发表:
同意，低浓度的加标回收率建议多做几次空白值。
曲线方程y=bx+a，当吸光度x为0时，y=a=0.0128mg/L，标准曲线对a值有什么要求和规定吗？
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独行菜
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2014/8/2 9:26:19 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 郭景祎(guojingyi-2010) 发表:
浓度越低，准确度越低，要选择合适的曲线和加标量
曲线方程y=bx+a，当吸光度x为0时，y=a=0.0128mg/L，标准曲线对a值有什么要求和规定吗？
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谁折腾
yzhlai
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2014/8/2 9:44:17 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 独行菜(v2917169) 发表:
做标准曲线时，0.01mg/L吸光度为0.005，由此得出上面的标准曲线。但这次做空白加标回收，0.01mg/L加标样吸光度同样测得为0.005，代入曲线的浓度为0.01765，回收率就170多了。

曲线方程y=bx+a，当吸光度x为0时，y=a=0.0128mg/L，标准曲线对a值有什么要求和规定吗？


才0.005的吸光度，对应的浓度是不适合做加标浓度的，太低了

一般认为，在分光光度法中，测定下限对应的吸光度约为0.010，而测定下限一般是方法检出限的4倍，低于测定下限的浓度的可信度就大打折扣了。如真要做低浓度加标回收率，加标浓度对应的吸光度起码得0.010以上，针对楼主的情况，加标浓度起码得是0.020mg/L。

不过标线似乎不太好，
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郭景祎
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2014/8/2 9:46:09 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 独行菜(v2917169) 发表:
原文由 郭景祎(guojingyi-2010) 发表:
浓度越低，准确度越低，要选择合适的曲线和加标量
曲线方程y=bx+a，当吸光度x为0时，y=a=0.0128mg/L，标准曲线对a值有什么要求和规定吗？
这个具体数值我不是很清楚，论坛里老兵比较了解这些
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谁折腾
yzhlai
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2014/8/2 9:53:43 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
个人的理解，标线方程，把方法检出限浓度代入方程中，得出的吸光度应大于0，如果小于0，可能是标准曲线点的最高浓度点与最低点的比例太大了，比例建议在100以内（针对线性范围较广的），有些可能得限制在20或10以内；

如果代入后的吸光度太大，估计是试剂空白比较高，得查出哪种试剂导致，有办法就更换试剂；当然，如果试剂空白的吸光度稳定，也可以通过扣除空白的方法处理

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独行菜
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2014/8/2 12:54:37 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 谁折腾(yzhlai) 发表:
个人的理解，标线方程，把方法检出限浓度代入方程中，得出的吸光度应大于0，如果小于0，可能是标准曲线点的最高浓度点与最低点的比例太大了，比例建议在100以内（针对线性范围较广的），有些可能得限制在20或10以内；

如果代入后的吸光度太大，估计是试剂空白比较高，得查出哪种试剂导致，有办法就更换试剂；当然，如果试剂空白的吸光度稳定，也可以通过扣除空白的方法处理

感觉挺有道理，谢谢专家的解答！
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